在CHO细胞周期不同时相时氮气和空气对辐照效应的影响--《职业医学》1984年06期
在CHO细胞周期不同时相时氮气和空气对辐照效应的影响
【摘要】：正 众所周知,电离辐射能损伤DNA,诱发染色体畸变。X线引起的DNA损伤主要有三种类型,即单链断裂(SSB),双链断裂(DSB)和碱基损伤(BD),这在细胞各周期都是一臻的。但电离辐射即使在大剂量
【关键词】：
【正文快照】：
·众所周知,电离辐射能损伤DNA,’诱发染色体畸变。X线引起的DNA损伤主要有三种类型,即单链断裂(SSB)、双链断裂(DSB)和碱基损场(BD),这在细胞各周期都是一致的。但电离辐射即使在大剂量时,姊妹染色单体交换(S CE)率不受影响或仅受轻微影响。而烷化剂和紫外线则显著引起染色
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京公网安备75号> 【答案带解析】下列有关细胞周期和细胞分裂的叙述， 正确的是（ ） A．不同生物的细胞大小和数目...
下列有关细胞周期和细胞分裂的叙述， 正确的是（
）A．不同生物的细胞大小和数目不同， 但细胞周期长短相同 B．同一生物各种组织的细胞周期长短相同， 但G1、S、G2和M期长短不同 C．若在G2期加入DNA合成抑制剂，则有丝分裂前期每个染色体仍含有2条染色单体，子细胞染色体数目与母细胞的相同 D．减数分裂前期 I 同源染色体配对，每个染色体含有4条染色单体，子细胞染色体数目为母细胞的一半 
【解析】不同生物的细胞大小和数目不同，不同的细胞在分裂时其细胞周期的长短也各不相同；A错误。同一生物各种组织的细胞周期长短各不相同，构成细胞周期的G1、S、G2和M期长短也不相同；B错误。DNA的复制在S期进行，若在G2期加入DNA合成抑制剂，则不影响染色体中DNA的复制，有丝分裂前期每个染色体仍含有2条染色单体；C正确。减数第一次分裂前期同源染色体联会形成四分体结构，此时每个染色体含有...
考点分析：
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下列有关艾滋病（AIDS）的叙述， 正确的是（
）A．某些逆转录酶抑制剂可用于治疗艾滋病 B．艾滋病主要是通过唾液、 食物和昆虫传播的 C．HIV 的遗传物质直接整合到宿主细胞的染色体中 D．患者的细胞免疫功能严重减退而体液免疫功能不受影响 
[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：（1）用基因工程方法制备HIV的某蛋白（目的蛋白）时，可先提取HIV中的
，以其作为模板，在
的作用下合成
。获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。（2）从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是
。该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是
。（3）已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分
细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。（4）人的免疫系统有
癌细胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。 
[生物——选修1：生物技术实践]（15分）已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于
染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用
（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以
为碳源的固体培养基进行培养。（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用
直接计数；若要测定其活菌数量，可选用
法进行计数。（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，
℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕
℃设计后续实验。 
（9分）假设某果蝇种群中雌雄个体数目相等，且对于A和a这对等位基因来说只有Aa一种基因型。回答下列问题：（1）若不考虑基因突变和染色体变异，则该果蝇种群中A基因频率：a基因频率为
。理论上该果蝇种群随机交配产生的第一代中AA、Aa和aa的数量比为
，A基因频率为
。（2）若该果蝇种群随机交配的实验结果是第一代中只有Aa和aa两种基因型，且比例为2：1，则对该结果最合理的解释是
。根据这一解释，第一代再随机交配，第二代中Aa和 aa基因型个体数量的比例应为
（10分）现有一未受人类干扰的自然湖泊，某研究小组考察了该湖泊中牌食物链最高营养级的某鱼种群的年龄组成，结果如下表。年龄0+1+2+3+4+5+6+7+8+9+10+11+≥12个体数92187121706962637264554239264注：表中“1+”表示鱼的年龄大于等于1、小于2，其他以类类推。回答下列问题：（1）通常，种群的年龄结构大致可以分为三种类型，分别
。研究表明：该鱼在3+时达到性成熟（进入成年），9+时丧失繁殖能力（进入老年）。根据表中数据可知幼年、成年和老年3个年龄组成个体数的比例为
，由此可推测该鱼种群数量的变化趋势是
。（2）如果要调查这一湖泊中该值的种群密度，常用的调查方法是标志重捕法。标志重捕法常用于调查
强、活动范围广的动物的种群密度。（3）在该湖泊中，能量沿食物链流动时，所具有的两个特点是
题型：选择题
难度：中等
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满分5 学习网 . All Rights Reserved.人类在体细胞周期核心机制多样性--《华中科技大学》2010年博士论文
人类在体细胞周期核心机制多样性
【摘要】：
目的：将正常的胃、肠及口腔黏膜上皮组织制备成高质量的单细胞悬液,可供流式细胞仪检测；并建立人类在体细胞的细胞增殖周期研究模型。
方法：应用不同浓度的胃蛋白酶和Dispase尝试去除胃、肠、口腔粘液和分离获得粘膜层后,再使用机械剪碎法制备成单细胞悬液并用滤网过滤细胞；另外部分标本采用棉签直接刮取正常人群的口腔黏膜上皮细胞,并用滤网过滤之。然后用流式DNA直方图来验证获得的单细胞的各周期比例,进一步采用Ki67/DNA双参数法检测细胞的增殖能力。对照组是单用机械剪碎法和单用酶消化法以及人类外周血淋巴细胞。
结果：我们发现0.05-0.1%的胃蛋白酶浓度和1.2-2.4 u/ml的Dispase浓度能够较好的去除胃、肠、口腔粘液而获得粘膜层,然后剪碎并吹打,制备成胃、肠、口腔粘膜上皮细胞的单细胞悬液；用棉签刮取的口腔黏膜上皮组织滤过之后直接成为单细胞悬液,显微镜下观察发现细胞形态较完整,细胞数量大于1×106,细胞存活率大于90%,从而都能够采用流式技术进行单细胞分析。流式DNA含量法检测胃、肠、口腔黏膜上皮细胞G1期约占80%-82%,S期约占11%-12%, Ki67/DNA双参数法检测胃、肠、口腔黏膜上皮组织的增殖率分别为11.67%、27.79%、23.48%,均低于体外培养的淋巴细胞。
结论：利用胃蛋白酶和Dispase能够去除胃、肠、口腔粘液,较容易获得高质量的胃、肠、口腔粘膜上皮细胞的单细胞悬液,样本完全适合FCM分析,结果满意。胃、肠、口腔粘膜上皮细胞具有明显的细胞分裂周期,适合成为人类在体细胞的细胞增殖周期研究模型。
目的：以胃、肠和口腔黏膜上皮细胞为研究对象,研究人类正常在体细胞的细胞周期核心调控因子的表达情况。
方法：采用Western blot分析各种细胞周期调控因子Cyclins (A, B1, D1, E), CDKs (CDK1,2,4,6)、CKIs (P27, P21, P19, P16)和Rb的表达；并与正常人外周血淋巴细胞(PBL)和体内骨髓单个核细胞(MNC)作为对比分析。
结果：Western blot分析结果显示：口腔黏膜上皮细胞(OME)中cyclin D1明显表达,cyclin A、cyclin B1和cyclin E无表达或微弱表达；胃、肠黏膜上皮细胞(GME和IME)中cyclin A、cyclin B1、cyclin D3和cyclin E均无表达或微弱表达。口腔黏膜上皮细胞中CDK2、CDK4和CDK6明显表达,而CDK1无表达或微弱表达；胃肠黏膜上皮细胞中CDK2明显表达,并且胃黏膜上皮细胞中CDK2的表达比肠黏膜上皮细胞的表达要低,而CDK1、CDK4和CDK6无表达或微弱表达。口腔黏膜上皮细胞中p19、p21和p27明显表达,而p16无表达或微弱表达；胃肠黏膜上皮细胞中p19明显表达,而p16、p21和p27无表达或微弱表达。胃、肠、口腔黏膜上皮细胞中Rb无表达或微弱表达。
结论：细胞周期调控因子体内细胞与体外培养细胞中的表达以及体内细胞与细胞之间的表达并不完成相同,提示人类在体细胞周期核心机制可能存在多样性。
目的：探讨人类在体细胞(胃、肠、口腔黏膜上皮细胞)的细胞周期核心调控机制,即Cyclins时相性起伏及CDKs序列激活规律。
方法：Cyclins时相性表达规律：Post-sorting Western blot(分选后蛋白电泳技术)检测四种Cyclins在细胞周期不同时相中的表达。CDKs序列激活规律：Post-sorting Western blot(分选后免疫共沉淀技术)分析Cyclins和CDKs的相互结合规律。阳性对照采用正常人外周血PHA刺激培养的淋巴细胞(PBL)和体内骨髓单个核细胞(MNC)。
结果：Cyclins时相性表达规律：体内OME的表达规律是：Cyclin D1在G1早期合成,S期和G2/M期开始下降；Cyclin E、Cyclin A和Cyclin B1无表达或在G1期有微弱表达。体内GME和IME的表达规律是：Cyclin D1、Cyclin E、Cyclin A和CyclinB1无表达或在G1期有微弱表达。CDKs序列激活规律：在OME中,在G1、S.G2/M期,Cyclin D1均与CDK2、CDK4、CDK6结合；在G1期,cyclin D1/CDK4/CDK6结合最多；在G2/M期,cyclin D1/CDK2结合最多。在GME和IME中,在G1、S、G2/M期,Cyclin D1、CyclinE、Cyclin A和Cyclin B1均与CDK2仅有微量的结合。
结论：人类在体增殖细胞的细胞周期核心调控机制——Cyclins周期时相性起伏及CDKs序列激活规律,在体内细胞与细胞之间以及体内细胞与体外细胞之间均存在重要的差别,人类在体细胞的细胞周期核心机制存在多样性。
【关键词】：
【学位授予单位】：华中科技大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2010【分类号】：R329【目录】：
参考文献10-11
第一部分:正常胃、肠及口腔黏膜上皮细胞制备成单细胞悬液与人类在体细胞的细胞周期调控机制研究模型的建立11-27
ABSTRACT12-14
材料和方法14-20
实验结果20-24
参考文献26-27
第二部分:人类在体细胞的细胞周期调控因子的研究27-48
ABSTRACT28-29
材料和方法30-40
实验结果40-43
参考文献45-48
第三部分:人类在体细胞的细胞周期核心调控机制的研究——CYCLINS时相性起伏及CDKS序列激活规律48-64
ABSTRACT49-50
材料和方法51-55
实验结果55-58
参考文献61-64
[全文总结和总讨论]64-68
综述68-107
附录 发表文章107-108
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【关键词】：
【正文快照】：
植物分生组织的细胞是一群富有增殖能力的细胞,处于非同步分裂的状态。因而,分生组织中,每一时刻都有不同时相的细胞。不同周期时相的细胞,辐射敏感性并不相同。分生组织一旦受伤,由于存在抗辐射时相细胞的再增殖,可以得以康复。可见,研究分生组织细胞的辐射敏感性和细胞周期
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