酶标仪全波长酶标仪650能用630代替吗

酶标仪使用方法
酶标仪使用方法
范文一:酶标仪的使用方法 作为微孔板比色计的酶标仪,其基本功能不外乎一个比色测定,所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异,当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。在临床实验室实际工作中,实验人员在使用酶标仪进行测定操作时,有时难免会对酶标仪的一些性能指标产生迷惑,甚至对酶标仪的应用产生错误的理解。如诸如使用酶标仪较用肉眼观察测定的阳性率明显增加这样的问题。一、
测定波长目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有最大吸收,当pH值降为L 0时,最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大
一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。。除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,其他滤光片可根据自己的需要选择。有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能,此时需要一个340nm波长滤光片。此时,酶标仪的测定波长范围就成为340-750nm或800nm。酶标仪有单波长和双波长检测功能有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定;而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外,同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定,酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的,来自于板子上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此,在ELISA比色测定中,最好使用双波长,且不必设空白孔。二、测定的吸光度范围通常,酶标仪的吸光度测定范围在。0-2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0-2.5之间,但现在基本上都做了拓宽,可达到3.5以上,并且能保持很好的精密度与线性。如Labsystems公司Dragon Wellscan MK-2的吸光度测定范围为0-3.5,而Multiskan Ascent的吸光度测定范围(Abs)达0-4.0,在0-4.0范围,线性误差不超过±2.0%,在0.3-3.0吸光度范围内,测定精密度CV小于±0.2%;3.0-4.0 Abs范围内,测定精密度CV小于士0.2%。因此,对于酶标仪的吸光度范围不必去刻意追求大的吸光度范围,主要要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何。三、光学系统酶标仪的光学系统采用的是垂直光路多通道(通常为8或12通道,亦有单通道)检测,一般为硅光管或光导纤维,除测定通道外,有的酶标仪还有一个参比通道,每次测定可进行自我校准。酶标仪的光学系统功能如何,均可通过酶标仪测定的吸光度范围、线性度、精密度和准确度等体现出来。光学系统好的话,则上述指标也应较佳。测定的精密度与测定通道之间的均一性有直接关系。单通道可避免因通道不同所致的差异。四、检测速度酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。检测速度快,有利于提高检测的精密度,即避免由于测定过程中,因测定时间不同所致的各微孔间吸光度间的差异。目前市场上常见的酶标仪检测速度都非常快,通常在数秒钟内,如Labsystems公司Dragon Wellscan MK-2和MK-3检测96孔只需2s(连续模式)或5s(步进模式)。Multiskan Ascent为单通道检测,亦只需9s(连续模式)或14s(步进模式)。又如BioRad公司的Benchmark的检测速度单波长为7s,双波长为15s。五、震板功能酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀,使板孔内颜色均一。目前市场上常见的酶标仪均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节,如Labsystems的MK-2;有的则较为固定,如BioRad 550。使用有震板功能的酶标仪,在进行ELISA测定显色反应完成加入终止剂后,可不必振荡混匀,直接放人酶标仪上测定即可。六、温育功能温育功能是指酶标仪本身能按要求自动精确地控制仪器内部的温度,使得ELISA测定中微孔板条的温育过程可在仪器内部完成,而无需再外配温箱。目前,只有少部分酶标仪具有此种功能。七、软件功能软件功能是指酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶标动力学、紫外和凝集等数据的统计分析并报告结果的功能。软件功能是中高档酶标仪的一个非常重要的功能。如果硬件方面区别不大,则软件就成为判定酶标仪优劣的惟一指标。对于用户来说,好的软件功能,对实际工作会有较大的帮助。ELISA定性测定,酶标仪如具有阳性判断值(cut-off)及其测定“灰区”(即指测定吸光度处于cut-off周围的一定区域,此区域内结果应为“可疑”)的统计计算功能,不但方便了实验室工作人员,而且在某些特定的情况下,有很高的实用价值。如血站实验室为筛检献血员血进行HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA测定时,常会遇到测定吸光度处于cut-off附近但又低于cut-off的血,按照试剂盒的标准,可判为阴性,血为合格血,可用于患者输血,但直觉告诉我们,这样的血如输给患者,导致输血后相应疾病发生的可能性较大,这是由ELISA现有的测定技术的不确定性所造成的,也就是ELISA测定的“灰区”的存在使得ELISA测定试剂盒cut-off的设定只是相对的准确,此时的假阳性和假阴性出现的可能性较低。因此,在血站筛检献血员血时,如以测定“灰区”的下限作为判断献血员血筛检不合格标准,就可以避免因“灰区”所致结果判断错误而引起输血后疾病发生的可能性。合适的软件功能对于ELISA定量测定同样很重要。有研究表明,四参数方程能较好地反映免疫测定的剂量反应曲线,最为适合于定量酶免疫测定的曲线拟合。因此,如目的是定量测定,则在酶标仪的软件功能中,最好要有这种曲线回归方程计算分析功能。其他诸如连点、直线等回归计算,则可根据酶标仪的应用目的而定,如兼用于微量生化测定,则此类回归计算就很有必要。八、语言界面通常进口的中高档酶标仪人机对话多采用英文。这对于某些基层实验室可能会存在语言方面的困难,从而难以最大限度地发挥酶标仪的作用。为解决这方面的问题,已有一些酶标仪采用了中文界面,如Labsystems的MK-3。这样就大大方便了广大基层实验室技术人员的使用。综上所述,尽管酶标仪的发展极为快速,种类繁多,功能也不断加强,但其最根本的功用是不变的,即比色测定。大凡比色测定,其基本要求就是在一定吸光度范围内要有好的测定准确性、线性和精密性。同样的吸光度范围,测定的准确性、线性和精密性越好则酶标仪亦越佳。而且,由于用于酶标仪比色测定的为多孔(通常为96孔)微孔板条,为保证测定的孔间重复性,则测定速度也是一个较重要的性能指标。至于其他如震板、温育及有关的软件功能,则可根据各自实验室的需要去比较选择。
范文二:酶标仪的使用方法点击次数:2886 发布时间: 17:26:29 作为微孔板比色计的酶标仪,其基本功能不外乎一个比色测定,所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异,当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。在临床实验室实际工作中,实验人员在使用酶标仪进行测定操作时,有时难免会对酶标仪的一些性能指标产生迷惑,甚至对酶标仪的应用产生错误的理解。如诸如使用酶标仪较用肉眼观察测定的阳性率明显增加这样的问题。一、
测定波长目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有最大吸收,当pH值降为L 0时,最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大
一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。。除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,其他滤光片可根据自己的需要选择。有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能,此时需要一个340nm波长滤光片。此时,酶标仪的测定波长范围就成为340-750nm或800nm。酶标仪有单波长和双波长检测功能有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定;而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外,同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定,酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的,来自于板子上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此,在ELISA比色测定中,最好使用双波长,且不必设空白孔。二、测定的吸光度范围通常,酶标仪的吸光度测定范围在。0-2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0-2.5之间,但现在基本上都做了拓宽,可达到3.5以上,并且能保持很好的精密度与线性。如Labsystems公司Dragon Wellscan MK-2的吸光度测定范围为0-3.5,而Multiskan Ascent的吸光度测定范围(Abs)达0-4.0,在0-4.0范围,线性误差不超过±2.0%,在0.3-3.0吸光度范围内,测定精密度CV小于±0.2%;3.0-4.0 Abs范围内,测定精密度CV小于士0.2%。因此,对于酶标仪的吸光度范围不必去刻意追求大的吸光度范围,主要要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何。三、光学系统酶标仪的光学系统采用的是垂直光路多通道(通常为8或12通道,亦有单通道)检测,一般为硅光管或光导纤维,除测定通道外,有的酶标仪还有一个参比通道,每次测定可进行自我校准。酶标仪的光学系统功能如何,均可通过酶标仪测定的吸光度范围、线性度、精密度和准确度等体现出来。光学系统好的话,则上述指标也应较佳。测定的精密度与测定通道之间的均一性有直接关系。单通道可避免因通道不同所致的差异。四、检测速度酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。检测速度快,有利于提高检测的精密度,即避免由于测定过程中,因测定时间不同所致的各微孔间吸光度间的差异。目前市场上常见的酶标仪检测速度都非常快,通常在数秒钟内,如Labsystems公司Dragon Wellscan MK-2和MK-3检测96孔只需2s(连续模式)或5s(步进模式)。Multiskan Ascent为单通道检测,亦只需9s(连续模式)或14s(步进模式)。又如BioRad公司的Benchmark的检测速度单波长为7s,双波长为15s。五、震板功能酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀,使板孔内颜色均一。目前市场上常见的酶标仪均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节,如Labsystems的MK-2;有的则较为固定,如BioRad 550。使用有震板功能的酶标仪,在进行ELISA测定显色反应完成加入终止剂后,可不必振荡混匀,直接放人酶标仪上测定即可。六、温育功能温育功能是指酶标仪本身能按要求自动精确地控制仪器内部的温度,使得ELISA测定中微孔板条的温育过程可在仪器内部完成,而无需再外配温箱。目前,只有少部分酶标仪具有此种功能。七、软件功能软件功能是指酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶标动力学、紫外和凝集等数据的统计分析并报告结果的功能。软件功能是中高档酶标仪的一个非常重要的功能。如果硬件方面区别不大,则软件就成为判定酶标仪优劣的惟一指标。对于用户来说,好的软件功能,对实际工作会有较大的帮助。ELISA定性测定,酶标仪如具有阳性判断值(cut-off)及其测定“灰区”(即指测定吸光度处于cut-off周围的一定区域,此区域内结果应为“可疑”)的统计计算功能,不但方便了实验室工作人员,而且在某些特定的情况下,有很高的实用价值。如血站实验室为筛检献血员血进行HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA测定时,常会遇到测定吸光度处于cut-off附近但又低于cut-off的血,按照试剂盒的标准,可判为阴性,血为合格血,可用于患者输血,但直觉告诉我们,这样的血如输给患者,导致输血后相应疾病发生的可能性较大,这是由ELISA现有的测定技术的不确定性所造成的,也就是ELISA测定的“灰区”的存在使得ELISA测定试剂盒cut-off的设定只是相对的准确,此时的假阳性和假阴性出现的可能性较低。因此,在血站筛检献血员血时,如以测定“灰区”的下限作为判断献血员血筛检不合格标准,就可以避免因“灰区”所致结果判断错误而引起输血后疾病发生的可能性。合适的软件功能对于ELISA定量测定同样很重要。有研究表明,四参数方程能较好地反映免疫测定的剂量反应曲线,最为适合于定量酶免疫测定的曲线拟合。因此,如目的是定量测定,则在酶标仪的软件功能中,最好要有这种曲线回归方程计算分析功能。其他诸如连点、直线等回归计算,则可根据酶标仪的应用目的而定,如兼用于微量生化测定,则此类回归计算就很有必要。八、语言界面通常进口的中高档酶标仪人机对话多采用英文。这对于某些基层实验室可能会存在语言方面的困难,从而难以最大限度地发挥酶标仪的作用。为解决这方面的问题,已有一些酶标仪采用了中文界面,如Labsystems的MK-3。这样就大大方便了广大基层实验室技术人员的使用。综上所述,尽管酶标仪的发展极为快速,种类繁多,功能也不断加强,但其最根本的功用是不变的,即比色测定。大凡比色测定,其基本要求就是在一定吸光度范围内要有好的测定准确性、线性和精密性。同样的吸光度范围,测定的准确性、线性和精密性越好则酶标仪亦越佳。而且,由于用于酶标仪比色测定的为多孔(通常为96孔)微孔板条,为保证测定的孔间重复性,则测定速度也是一个较重要的性能指标。至于其他如震板、温育及有关的软件功能,则可根据各自实验室的需要去比较选择。
范文三:酶标仪使用方法一、仪器准备1.将MK3酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检,基础酶联,软件版本号。2.等待数秒后,荧屏显示“基础酶联,准备和时间”。表示仪器正常,处于等待状态。 操作规程1.工作人员心须详细阅读仪器操作使用说明书。2.将被测样品板放入酶标盘中,同时打开与酶标仪相连的打印机开关。3.按“测量模式”键:进入选择波长程序荧屏显示:“基础酶联”“1.单波长检测”按 “↑”“↓”选择单波长.双波长检测.4.按“输入”键:进入选择好的文件名状态。若选择单波长检测,荧屏显示:“1.单波长检测”“滤光片
405”再用数字键选择需要的波长.若选择双波长检测,荧屏显示:“2.双波长检测”“1.滤光片
450”再用数字键选择需要的第一检测波长.按”输入”键,荧屏显示:
“2双波长检测”“2.滤光片
630”再用数字键选择需要的第二检测波长.按”输入”键,荧屏显示:“2双波长检测”“ 无试剂空白”5. 继续 按”输入”键, 荧屏显示:“2双波长检测”“ 最终结果”(单波长无此步骤)6.按”输入”键,返回到荧屏显示“基础酶联,准备和时间”7. 按”开始”键, 启动阅读功能,酶标仪对样品板开始进行测试。8.读数完毕,被测孔子板复位,荧屏显示“正在传送数据”,等待数秒后,打印机开始打印测试结果。当打印完毕后,关闭打印机开关,荧屏回到主菜单状态。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。二、计算机控制1.将MK3酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检,基础酶联,软件版本号2.等待数秒后,荧屏显示“基础酶联,准备和时间”。表示仪器正常,处于等待状态。3.在lab-35计算机的桌面上打开“思桥检验科管理系统”,输入用户名“system”及密码“system”.4.进入系统后,选择“酶标仪”菜单。在下拉框中选择“酶标项目设置”(1)在面板当中进行单,双波长的设置,点击“仪器通迅设置”。(2)在“仪器通迅设置”面板上,默认为单波长的方式,如要选择双波长,勾选双波长的选框。(3)在主滤光片及副滤光片上选择相应的所需波长大小。(4)选择完成后,点击“确认”键,系统显示“设置成功”,按“确定”退回。(5)点击“退出”键,系统显示“酶标仪器设置成功”,按“确定”键返回到“酶标项目设置”的面板上。(6)在“酶标仪”的下拉框中选择“酶标仪操作”,在此面板中完成读板,数据存储及打印的工作。5. (1)点击“连机”,在状态栏显示“连机成功”,表明计算机已与酶标仪连接成功。(2) 点击“启动”,在状态栏显示“计算机远程控制成功”,表明计算机已远程控制酶标仪。如未显示此项,则读板功能不能完成,数据传输异常。(3)顺利完成上面两项后,继续点击“读板”键,启动酶标仪读板功能。数秒后,酶标仪开始读板,完成读板后,在“状态”栏显示“结果数据分离成功”,并在面板的样品栏显示读板后的数据。(在此“酶标仪操作”面板未关闭之前,可连续读板,如关闭面板需重复“连机”,“启动“)(4)点击“入库”键,系统显示“入库完毕”,按“确定”返回。此项完成了数据的存储。(5)点出“计算“键,系统显示“计算完毕”, 按“确定”返回。此项完成后才可以打印。(6)点出“打印”键,完成打印到此波长选择设置成功,点击“关闭”键,退出 “酶标项目设置”(7)当打印完毕后,关闭打印机开关。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
范文四:酶标仪使用方法酶标仪使用方法1、准备工作 (1)打开酶标仪开关,仪器开始自检,多孔板托架自动弹出,预热 15 min 以上; (2)打开电脑,点击桌面上的 KCjunior 软件,出现带 This product is licensed to huashida gene 5270201 字幕的对话框,单击 OK,进入软件界面; (3)界面有 5 个选项-Read Plate,Open Results,New Protocol,Open Protocol,Modify Protocol; (4) 如果初次检测, 单击 New Protocol 建立方法; 如果有建好的方法, 单击 Modify Protocol; 2、建立方法 (1)单击 New Protocol 后进入 Protocol Definition 对话框,在 General Information 菜单下输入 Protocol Name,Protocol Description 中输入对此方 法的描述,不需要此项可空; ( 2 ) 在 Read Method 菜 单 下 设 置 读 板 方 法 ( 有 End Point , Multiwavelength,Dynamtic 等); (3)在 Primary Wavelength 中输入主波长,如有参比波长(Reference Wavelenth)也输入; (4)在 Template 菜单下的 Well Type Selection 中,根据多孔板的位置 选择所设定的 Blank 和待测的 Sample; (5)在 Shake Mode 处,还可以选择震动模式和强度;建好方法后, 点击确定。 3、读取数据 将多孔板放入酶标仪,其缺角与托架上的对应;单击 Read Plate,在 Result ID 中随便输入信息或缺省,在 Plate Number 中输入板号后,多孔板 进入仪器开始读取数据;第1页 共2页 酶标仪使用方法酶标仪使用方法4、数据输出 待酶标仪读取完数据后,多孔板托架自动弹出,选择 Results 菜单下的 Exoport Date,即将所测数据导入至 Excel 表格;保存所测数据,关闭 KCjunior 软件,此时也可将建立的方法进行保存。 5、关闭仪器 取下多孔板,轻按酶标仪开关上方的小按钮,托架滑入仪器,这时关 闭仪器开关,最后关闭电脑及显示器开关。第2页 共2页
范文五:酶标仪简介:
酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。酶标仪原理:
酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。 随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长,而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片,只能截取特定波长进行检测。 检测单位光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。检测单位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。OD值由下述公式计算:c为检测物的浓度 b为检测物的厚度 a为摩尔因子在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。检测值计算仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在 0%一100%之间。透光值的计算如下:T=(Meas-Min)/(Max-Min)其中T为透光值, Meas为检测的二进位数值, Min为在 0%的情况下检测的二进位数值, Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:MaX=3600Min=20Meas=30T=(30-20)/.0028OD=log(1/T)=log(1/0.中心定位仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。光源的参照通道参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。用途和其它提示用于ELISA试剂的测定,广泛用于各种实验室,包括临床实验室。质量控制质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。空白校正 有一些试剂盒的说明书将空白孔设置为空气,其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的,请按照试剂盒的说明书要求进行。检测结果的解释由于有相当多的因素会影响检测的结果,如不同的酶标板,检测试剂的体积,都会造成OD值的不同,因此,只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行.结构折叠规格有24孔板,48孔板,96孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测.酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到.在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,聚光镜,光栏后到达反射镜,经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到光电管.从酶标仪工作框图和光路图上可看出,它和普通的光电比色计有以下几点差异:(l)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体.⑵由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液.⑶酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度.酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则靠手工移动微孔板来进行测量.在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仪,此类酶标仪一般都是自动化型的.它没有多个光束和多个光电检测器,如 12个通道的仪器设有 12条光束或 12个光源,12个检测器和12个放大器,在X方向的机械驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测.多通道酶标仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高.用途折叠可广泛应用于低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析(A260/A280)和蛋白定量(A280/BCA/Braflod/Lowery),酶活、酶动力学检测,酶联免疫测定(ELISAs),细胞增殖与毒性分析,细胞凋亡检测(MTT),报告基因检测及G蛋白偶联受体分析(GPCR)等。 应用范围折叠分类 项目名称 简 称血液学检验 血小板相关抗体的检验 PAIgA、PAIgG、PAIgMD-二聚体的测定 D-Dimer血清纤维蛋白降解产物的测定 FDP三碘甲腺原氨酸、四碘甲腺原氨酸测定 T3、T4免疫学检验 C反应蛋白的测定 CRP免疫球蛋白的测定 IgD、IgE循环免疫复合物的测定 CIC类风湿因子的测定 IgG、IgA、IgM类RF抗甲状腺球蛋白抗体、微粒体抗体的测定 TG、TM肿癌免疫学检测 甲胎蛋白的测定 AFP癌胚抗原的测定 CEA前列腺特异抗原的测定 PSA胰癌、胆道癌、胃癌的测定CA19-9卵巢癌的测定 CA125乳腺癌的测定 CA15-3宫颈鳞癌的测定 SCC多发性骨髓癌的测定甲状腺癌的测定 hTG传染病免疫学检验 甲肝血清学的检测 抗HAV-IgM乙肝血清学的检测 两对半丙肝血清学的检测 抗HAV-IgG、抗HCV-IgM丁肝血清学的检测 抗HDV-IgG、抗HDV-IgM戊肝血清学的检测 抗HEV-IgG肾综合征出血热类抗体的检测 HFRS-IgG乙型脑炎病毒抗体的检测 IgM人类免疫缺陷病毒抗体(即艾滋病)的检测 HⅣ β 2 M优生优育功能检测 弓形虫(体)病毒的检测 TOXO风疹病毒的检测 RV巨细胞病毒的检测 CMV单纯疱病毒的检测 抗HSV(Ⅰ、Ⅱ)其 它 本仪器还可做基因检验及兽残、农残检验项目等选购指南折叠酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,特别在近几年中,由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用,使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛,同时促进了生殖健康技术水平提高。目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目,如:乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏科学的依据。例如:某弓形虫检测试剂盒中,临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行,但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。国内多家权威机构,如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性,并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读,酶免试剂的质控也应使用酶标仪,并提供酶标仪测定的原始数据,而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如:肝炎、艾滋病、优生优育等),判读更要求严谨,由误诊引起的纠纷很难处理。另外,住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段,正逐渐被许多单位所采用。诊断方法折叠中国免疫诊断方法主要有如下三种:酶免(EIA)、放免(RIA)和发光,在市场上的情况如下: 方法所处市场周期放免衰退期酶免成长期发光进入期放免技术由于试剂的污染和有效期等问题在国际和国内市场逐渐被淘汰,而化学发光试剂和设备比较昂贵,使得其在国内的普及特别在计生系统普及需要较长时间,EIA技术稳定,试剂价格合理,供应充,酶免技术在中国市场处于成长期,因此购买酶标仪正合适宜。 工作环境折叠酶标仪是一种精密的光学仪器,因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性,还能够延长其使用寿命。根据DINVDE0871条例,仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。依据DIN45635-19条例:仪器应放置在低于40分贝的环境下。为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。操作时环境温度应在15℃-40℃之间,环境湿度在15%-85%之间。操作电压应保持稳定。操作环境空气清洁,避免水汽,烟尘。保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。规格性能光学系统折叠光栅光路系统,包括内建的参比检测通道,确保任何测量情况下获得一致的结果。 光路折叠长寿命闪烁氙灯光源,光栅单色光发生器,200 ~1000 nm波长范围内全波长扫描,1nm步进检测模式折叠在微孔板检测模式和比色杯检测模式下均可进行全波长范围光谱扫描,对样品和空白同时扫描。光谱扫描速度折叠10s,200~1000nm,1nm步进样品前处理折叠无需衍生处理,即可直接测定DNA、RNA和蛋白的吸光值。光程校准折叠使用微孔板检测时可直接读出OD值和浓度,对于水相溶液可使用光程校正样品容器折叠可使用96&384孔板,或标准杯/微量杯带宽折叠带宽2.4nm读数范围折叠0 ~ 4 OD线性范围折叠@450nm:0 ~ 2.5 Abs,±2%检测准确度折叠@450nm:1%+0.003 Abs(0~2.0Abs),2%(2.0~2.5Abs)检测精度折叠@450nm 检测速度:折叠8s/96孔;13s/384孔温控范围折叠微孔板和比色杯模式均具温控功能,温控范围(室温+4)~ 65℃振荡模式折叠轨道,双轨道和线性三种调速振荡模式,动力学过程中可执行背景振荡模式数据处理及分析折叠通过PC端数据分析软件Gen5进行操作和设置曲线拟合、定量分析、定性分析、动力学计算、自定义方程以、平行线分析(PLA,符合欧盟法规要求)及效价分析等。数据可一键导出到Excel,也可生成详尽的结果报告。 电源折叠电源输入 100 - 240 V (50/60 Hz),最大功率消耗 90W体积折叠外部尺寸(H x W x D) 216 x 216 x 406mm重量折叠11kg配置折叠全波长读数仪一套(含比色杯基座)(比色皿必须为立式),标准96孔酶标板一包,电源线壹根,说明书一份,软件光盘一张。 操作事项酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果,因此要得到准确结果,试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项: 使用加液器加液,加液头不能混用。洗板要洗干净。如果条件允许,使用洗板机洗板,避免交叉污染。严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。在测量过程中,请勿碰酶标板,以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格按照试剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。如果仪器接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒。不要在测量过程中关闭电源。对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到最佳效果。 使用后盖好防尘罩。出现技术故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。 技术参数折叠常见故障一、常见故障1、 打印机不工作⑴ 酶标仪后部DIL开关设置不正确。DIL标准设置:左 下下下下下下上下 上上下下上下上上 右(人站在仪器后部,面向仪器)。⑵ 酶标仪内置打印机开关处于开的位置。应在总参数中设置内置打印机为关。⑶ 打印机接口接错(接在了计算机接口上了)。应将打印机联系接在DIL开关正下方的打印机接口上,RS-232接口为计算机接口。⑷ 打印机联线有问题:有些配备的新打印机联线仍有问题,请确保打印机联线无问题。 ⑸ 打印机未联机,请确认打印机上的联机键已联机。⑹ 打印机无纸或纸未装好,请装好打印纸。⑺ 有些打印机有开机顺序,有的需先开打印机,后开仪器;有的需先开仪器,后开打印机。2、 调不出所编程序 必须在相应程序模块下调出。如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。3、 肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大⒊1 滤光片设置不正确:请在⒊2 空白或阴性位置不正确。二、 仪器的检查测试1、 检测电源部分的输出电压电源部分输出电压可以通过检测MUSCU板上X11元件得到,每个点的正确对地电压应该是(顺序为从左至右):5V、0V(地电压)、15V、24V、-15V、0V。2、 光源电压的测试和调节测量光源电压,如果发现所测的结果不符合规定要求可以调节电源上的R39元件。其操作步骤如下:⑴ 打开电源开关,使仪器处在工作状态。⑵ 用电压表测量光源电压,正常电压应在6.7~6.9V之间。⑶ 选择405nm波长的程序,按⑷ 如果光源电压不正常,关闭电源开关。旋松测量部分上盖螺丝并移去上盖。⑸ 旋松轨道部分的固定螺丝并移动轨道部分(要特别小心以防损伤轨道部分和主板及电源部分的连线!),能看到轨道下面的电源即可。⑹ 打开电源开关,调节电源上R39元件,再重复上面步骤2测量光源电压,一直到正确为止。三、 仪器的校正1、 调节显示屏幕的亮度这可以通过调节MUSCU板上的R14元件来实现。2、 检查同步性⑴ 转动断路器轮把示波器的探针接在电路板MUSCU2的D29元件的第二个脚上测定信号的周期,正确的值应该介于5.1ms~5.4ms之间。如果超出这个范围,可以通过调节CHOPT电路板上R3元件来校正。检测活动结束后要用带有颜色的漆锁定它的正确位置。⑵ 检查同步性a) 按b) 当在MACU2板D7元件的第14脚上测量信号的A/D转换时,测得的时段信号应该在信道的中间。如果不符,可以通过上下移动CHOPT板来调整。3、 调整时钟频率⑴ 按⑵ 用频率计数器在MUSCU板上的D28元件的第13脚处测定时钟频率,正确的值应该为fck=32768Hz。这可以通过调节该板上的电容器C4来校正。⑶ 值得注意的是,在这个测定过程中不能用4、 存储机器的系列号按四、 仪器的检验1、 重复性:在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度即可重复性,可用CV值来表示。在某一特定的滤光片下测定某一块酶标板20次,用统计学方法求出所有测量值的均值和标准差。公式如下:所有测量值的标准差CV %= ------------×100%所有测量值的均值2、 精确性:待测物的测定值与一可接受的参考值之间的差异。此项指标需用雷勃公司标准板(PVT)来测。测量值 - 参考值精确性= ---------- ×100%参考值3、 光路检测:将一块酶标板正放测量一次,再将酶标板反放测量一次,查看同一孔吸光值是否相同,从而查看其所有光路8通道是否均一。⑴ 查看光路上的透镜是否清洁。⑵ 灯泡好否及亮度是否正常。⑶ 滤光片是否清洁。4、 载轨运动:开机后酶标仪能否自检,自检结束后揿5、 按键膜的好坏:开机后试用所有按键膜,查看其功能是否完好。
范文六:规范酶标仪的操作程序,正确使用酶标仪,保证酶标仪检测工作顺利进行和酶标仪日常维护。2
适用范围可用来进行标准光密度测定和凝集反应检测。3
职责酶标仪操作人员按照本规程操作酶标仪,并作使用记录。酶标仪管理人员负责监督酶标仪操作人员是否按本规程操作,对酶标仪进行定期保养。科室负责人负责酶标仪综合管理。 4
注意事项4.1
环境要求:注意防电、防震,远离强磁场,避免日光直接照射;不要在过湿或温差过大的环境下工作。应在机器两边留出足够的空间以保证空气流通。4.2
技术特性:主件电源 200-240V,50/60H2,工作范围:180-260V。电源0.7A(200-240V)。保险丝 2×3.5A。使用温度范围:+10℃—+40℃。预热速度L需1分钟自检。酶标板,建议使用平底酶标板。光谱范围:400-750nm。测量范围:0-2.000吸收单位。准确度:±2%或±0.007吸收单位。4.3
日常维护4.3.1
保养4.3.1.1
为保证本酶标仪持续的稳定性和准确性,应避免干扰光学系统的任何部件。4.3.1.2
保持光学系统的清洁,以确保正常功能和结果的准确,避免任何液体流入仪器内部。应防尘、防止其它外源性物质,不用手指触摸透镜表面、滤光片、光电检测器。4.3.2
仪器日常清洁4.3.2.1
关掉仪器开关应拉掉电源插头。4.3.2.2
使用一次性手套,用一次性擦布沾水或温和去污剂,清洁仪器外部、导轨和板架。4.3.3
严格遵守操作规程,如仪器出现故障,应马上退出检测状态,立即向保管人员或科室负责人报告,查明原因,及时处理,不得擅自“修理“,并做好使用和故障情况登记及实验记录。5
将酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检。等候1分钟预热。5.2
将打印机开关打开,打印机自检,放置打印纸。5.3
选择程序模式时,先按转换键,确定程序模式后,再按输入键,进入自检并完成。5.3.2
选择测量模式:通过测量模式键来选择,可通过↑↓键查看测量模式目录,确定测量模式按输入键确认。5.3.3
选择测量参数:通过测量参数键或输入键来选择,也可通过↑↓键和数字键输入新参数。5.3.4
选择计算模式:用计算模式键设定。可用↑↓键查看计算模式。5.3.5
选择计算参数:用计算参数或输入键设定计算参数。5.3.6
储存程序:用可贮存键进行。5.3.7
按开始键。5.4
检测完毕,关闭打印机电源开关及酶标仪电源开关,并记录酶标仪使用记录。
范文七:实验二
酶标仪检测金属离子对 SOD 酶活性的影响一 实验目的通过SpectraMax M5 酶标仪的演示使用,了解该型号酶标仪的结构;掌握酶标仪的操作步骤与softMax Pro v5.0.1版本软件的使用。二 实验指导要点1.酶标仪仪器安装连接2.仪器使用、保养注意事项3.软件操作步骤三 仪器设备及实验材料SpectraMax M5 酶标仪 、softMax Pro v5.0.1版本软件、SOD提取液四 仪器检测参数设定1 SpectraMax M5 酶标仪构造 酶标仪需要用专门连接线(仪器自带)与电脑连接,并有连接线两边插头、仪器背面的插口和电脑背面的9针串口(COM)。2仪器使用、保养注意事项电源要求:酶标仪对电源要求很高,我们要求的电源有接地,并通过不间断电源UPS来对仪器和电脑接点,防止:1)大电流的冲击,2)电压不稳,3)突然断电。保养要求:有良好的电源,保持24小时开机。保持避光和干净的室内环境,维持一定的湿度(30%-80%)。维持室内比较恒定的温度,以20-22度为最适宜。适用6-384孔板。96孔微孔板内每孔可检测100-300ul溶液,最佳检测体积为200ul。 384孔微孔板内每孔可检测50-100ul溶液,最佳检测体积为80ul。检测后的微孔板和比色皿不要长期置于仪器插槽中,检测完后就从仪器中取出,避免溶液蒸发腐蚀或损坏仪器内部光路系统。如果为有腐蚀性或挥发性溶液,请带盖检测。对于可见光吸收检测,使用全透明微孔板;紫外光吸收检测,使用紫外可透全透明微孔板;荧光强度和荧光偏振,使用黑色不透明板,需要检测底读的用黑色底透微孔板;化学发光和时间分辨荧光,使用白色不透明微孔板。3 softMax Pro v5.0.1版本软件使用 双击图标即可打开以下软件操作界面: 1)单击即可进入如下界面: 首次使用该软件,在该界面可以填写Reader的型号,包括Molecular Devices所有类型(单功能和多功能)的酶标仪。选择您所购买的那款酶标仪型号,本例为SpectraMax M5。2)实验监测参数都设定完毕后,把微孔板或比色皿放入想对应的插槽,然后按可以启动仪器进行监测。3)仪器可以设定温度,均在室温以上加温。当开启温度控制后需使仪器的微孔板插槽置于关闭状态保持所设温度,如果处于打开状态,仪器会发出报警声,然后自动关闭微孔板插槽。4)该仪器有使用震荡功能,时间课设定1-999s。4 仪器参数设定所有对仪器的参数设定都可以在Settings 中完成。按住Settings键后出现如下对话框: 四种监测类别: 终点法检测 即获得在单一时间点的样品检测值动力学法监测 即获得在预先设定的时间段中样品在不同时间点的检测值波长扫描监测 即获得样品在连续多个波长处的检测值单孔多点监测 即获得每孔样品在多个位置进行监测并且平均后的检测值A终点法检测1) Read Mode可选择Fluorescence(荧光强度),Absorbance(光吸收),Luminescence(化学发光),Time Resolved(时间分辨荧光),Fluorescence Polarization(荧光偏振)五种读版模式。按实验选择其一。仪器默认读板方式为Top read(顶读),适用于均相溶液和悬浮细胞的监测;若在,,Read From Bottom"选项前打勾,则仪器改为Bottom Read(底读)读板方式,适用于贴壁细胞的监测。2)Wavelengths处可以选择监测几种波长,光吸收模式最多为6种,其他模式均为四种。a) 对于光吸收模式,可以在Lm1后面的框中填入监测所用波长。b) 对于荧光强度,时间分辨荧光和荧光偏振模式,可以在2个框中分别填入激发波长和发射波长。Cutoff一般选为自动(Auto)c)对于化学发光模式,一般用"All".当同时监测不止一色化学发光的时候可填入相应的检测波长。3)PathCheck仅用于光吸收模式,即将微孔板监测得到的原始光吸收值通过参比校正到1cm光径长度时的光吸收值。可选择"Water Constant"(以水做参比)和"Cuvette Refence"(在比色皿中加入相应溶液预读一次作为参比)。另外可以选择"Plate background constants(in ODs)"来扣除微孔板的本底值,即拿同批次的微孔板加入相同体积的水预先读一次检测波长,得到所有孔的数据取平均值,将平均值填入下面的框中。默认OD为0,类似于做空白对照。4)Assay Plate Type对于不同实验可以选择6-384孔板及其具体的板型。选择原则见硬件操作步骤及注意事项 5)More settingMore setting由两部分组成⑴ Calibrate
Carriage speed(板进入速度):normal or slow 调节进板速度,一般都使用“normal”当需要做到一些对震动敏感比如凝集反应的时候则选择,,slow"。Read Order(读数选择方式) :column or wavelength 在波长优先还是板优先中,一般选择板优先。用于多个波长在同一实验检测中的优先方式。,,Column Priority"是指每孔(每列)检测完多个波长后再移到下一个进行检测,,Wavelength Priority"是指一次实验中选取的所有孔先一次检测完一个波长后再从第一个孔开始按下一个波长读完所有孔直到把所有波长都检测完。Settling Time:设定微孔板进入仪器内部检测去后延迟多少时间(ms)进行检测。默认off,一般不选择。6) Shake选择before first read之后可以选择在读板之前震荡板多少秒。7)Speed Read使用动力学监测的时候可以选择speed read 。B 动力学法检测Timing与终点法相比,动力学法的设定只是在左边版面多了时间的设定。选择Timing后可以看到右侧参数设定中包含有‘Run time’即整个检测反应时间以及‘Intervel’即各监测点之间的时间间隔。鼠标点中这两个相应的数字框后可以进行时间的修改。如果时间间隔太短,会出现或者小的间隔时间取决于一次微板孔检测中同时监测多少个孔。C 波长扫描监测与终点法相比,’wavelength’的设定有所区别。1)光吸收检测和化学发光监测在,,start"和,,stop"的框中分别填入起始检测波长和终止检测波长。在,,stop"的框中填入监测点之间的步径最小为1nm步径。2)荧光强度检测分为两种: 的警报。最a 固定激发波长(Excitation)扫描发射波长(Emission)起始发射波长必须比固定激发波长要大。b 固定发射波长(Emission)扫描激发波长(Excitation)终止发射波长必须比固定激发波长要小。在各框中分别填入固定的波长,扫描的起始/终止波长,扫描步径。D 单孔多点监测Well Scan Editor与终点法相比,左栏多了孔内监测密度的设定。选中后出现右栏,如下图: 在"Pattern"下的中根据实验需要选择每孔检测横向3个点,纵向3个点,5个点和9个点。随着点数增加总检测时间增加。全部设定完后按对话框右下角的"OK"确认,回到文档界面。放入检测板,按图标栏的启动监测,结束后,数据即可显示。五 检测样品分组设定所有对样品的分组设定都可以在‘Template’中完成。 按‘Template’键后出现如下对话框:先用鼠标点中并拖曳,选中要进行编辑的孔,被选中的空会变黑 然后点击Groups栏中的下拉菜单选择所要进行的分组 具体设定步骤如下例。1.设定本底参照(BLANK) 点击进入上述界面,选中所用微孔A1 & A2 ,点击Groups栏中的下拉菜单选中blank。结果如图示为扣除本底(A1&A2平均值)的结果图。2.设定标准样品(Standards)及相应的标准曲线 当有一系列已知浓度梯度的样品做为标准样品时,点击其他的数据结果均显进入编辑界面,选中微孔B1/B2至D1/D2,点击Groups栏中的下拉菜单框:选中New…+,出现如下对话默认命名为 Group01, ‘ColumnFormat’选择‘Standards’,‘OK’确认。则得到下图微孔选择,,然后点击对话框右上角的
,进入对话框: ‘Start from’中‘Top’, ‘Bottom’, ‘Left’, ‘Right’表示该组内样品从那个方向起始排列。Replicates 表示复孔为几个孔,本例中选‘Top’,复孔 2 个。表示起始样品号为 Gr01,以后依次为 Gr02, Gr03…格 式 设 为 ‘Standards’ , 默 认 有 ’Sample Descriptor’ 样 品 描 述 如 下 图 , 并 名 为’Concentration’,’Units’后面可以填入适当的浓度单位,’Startingvalue’表示起始样品的浓 度,可以在框内填入相应数值。’Step by’表示以什么方式进行浓度梯度,前面下拉框可以选 择’+-*/’,后面框内可以填入计算的值,比如起始浓度是 2,增加 2,则选择+,输入 2。 对话框右下角"OK"确认,回到文档栏如下图。‘Plate’栏中显示出‘blank’和标准样品‘Group01’ 的扣除了本底的检测光吸收值。 由于添加了"Group01"在"Plate"栏下多了独立的"Group01"栏,栏内有样品数据表格,表格第 一栏是每列数据的名称,用于运行计算。 在此栏多加一列,对表格中每 个样品进行计算。点击中,按进入如下界面:可以在表格中 ‘Name’中填入该列数据的名称,即计算中所引用的名字。’Formula’中填入该列数据所应用 的公式。比如要得到每个样品复孔里检测值中最大的那个,可以在’name’ 中填入Max,’Formula’中填入 Max(Values)。按对话框右下角’OK’确认,回到’Group01’栏,如图。 在此栏中,按可以在表格底进入如下界面:下多加一条分析结果,对表格中样品进行总结性的计算。点击 ‘Name’中填入该总结的名称,即计算中所引用的名字。可以选择显示与否 ‘Hide Name’。‘Description’中填入对该总结的描述。‘Formula’中填入该总结所应用的公式。比如要得到该组数据中所有样品的平均检测值中最小的值,名称可填为‘Minimum’,‘Formula’写为Min(MeanValue)。对话框右下角‘OK’确认。转到如下栏:通过该种方法可以对同一组数据进行数据计算和结果分析。要对该组数据作图,可在软件界面上方的菜单条中选择"Experiment"中的"New Graph…": 在该对话框中,‘Name’中填入该条曲线的名称,即以后在数据计算中要引用的名字。‘Source’中选择所使用的原数据,该例中为 Experiment 中的 Group01。 和中可以通过下拉栏选择该曲线横坐标和纵坐标所用的数据,该例中选择Concentration和MeanValue。用于选择图中每个点的形状和颜色。对话框右下角"OK"确认转入:‘Title’内填入该图的名称,一张图中可以有多条曲线。’Type’中选择点散图(Scatter)或柱状图(Cluster/Stack bar)。本例中使用点散图。表示该图中有哪几条曲线,可以按"New…"在该图中增加曲线,按"Edit"对该曲线进行修改,按"Delete"删除该曲线。本例中仅为一条曲线。对话框右下角"OK"确认转入: 上图点击红色方框处的下拉菜单可以选择适当的曲线拟合,如下图。本例使用’Log-Log’。 选择后曲线图如下: 软件自动根据所选用的拟合方式,做出曲线图以及相应的曲线拟合数学公式中的参数。 3.设定未知样品(Unknowns)并根据标准样品计算相应的浓度 当有一系列未知浓度的样品在微孔板中被检测时,点击进入编辑界面,选中微孔A3和A4,点击Groups栏中的下拉菜单选中New…+,出现如下对话框:命名为Group02,’Column Format’选择’Unknowns’,’OK’确认。则得到下图微孔选择: 同样通过‘Series’,选择为两个样品Gr01, Gr02,复孔为1个。确认后进入文档界面,可看到:并多了Group02栏: 在该表格中,‘Values’表示检测值,‘Result’表示根据标准曲线带入检测值所得到的浓度。上图中目前显示Error,表示公式有误。鼠标双击‘Result’列或者鼠标点中‘Result’列,进入公式编辑界面‘Name’表示该列数据的名称,‘Formula’中的公式‘Interpx()’表示数据对应于曲线的横坐标值;’Values’现指group02的检测值;‘STD’表示默认的曲线名称,由于本例中标准曲线定义的名称为’Plot#1’,未定义过‘STD’,因此在上面的表格中报错‘Error’。现改为‘Plot#1’后按‘OK’确认。左下角的框表示小数点后有几位有效数字。回到如下表格。 经过修改公式后‘Result’回归为有效数据。当‘values’落在标准曲线范围以外,则会出现‘Range?’表示超出范围。六 酶标仪检测金属离子对SOD的影响按照上述方法选择 ‘终点法监测 ’,中‘Absorbance’
范文八:芬兰雷勃Mk3酶标仪使用中常见问题及解决方法发布日期:
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上上下下上下上上右(人站在仪器后部,面向仪器)。1.2 酶标仪内置打印机开关处于开的位置。应在总参数中设置内置打印机为关。1.3 打印机接口接错(接在了计算机接口上了)。应将打印机联系接在DIL开关正下方的打印机接口上,RS-232接口为计算机接口。1.4 打印机联线有问题:有些配备的新打印机联线仍有问题,请确保打印机联线无问题。1.5 打印机未联机,请确认打印机上的联机键已联机。1.6 打印机无纸或纸未装好,请装好打印纸。1.7 有些打印机有开机顺序,有的需先开打印机,后开仪器;有的需先开仪器,后开打印机。2. 调不出所编程序必须在相应程序模块下调出。如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。3. 肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大3.1 滤光片设置不正确:请在“参数”中按滤光片轮中实际的情况设置滤光片。3.2 空白或阴性位置不正确。二. 仪器的检查测试1. 检测电源部分的输出电压电源部分输出电压可以通过检测MUSCU板上X11元件得到,每个点的正确对地电压应该是(顺序为从左至右):5V、0V(地电压)、15V、24V、-15V、0V。2. 光源电压的测试和调节测量光源电压,如果发现所测的结果不符合规定要求可以调节电源上的R39元件。其操作步骤如下:2.1 打开电源开关,使仪器处在工作状态。2.2 用电压表测量光源电压,正常电压应在6.7-6.9V之间。2.3 选择405nm波长的程序,按“开始”键,同时测量光源处电压,正常值应在7.5-8.1V之间。2.4 如果光源电压不正常,关闭电源开关。旋松测量部分上盖螺丝并移去上盖。2.5 旋松轨道部分的固定螺丝并移动轨道部分(要特别小心以防损伤轨道部分和主板及电源部分的连线!),能看到轨道下面的电源即可2.6 打开电源开关,调节电源上R39元件,再重复上面步骤2测量光源电压,一直到正确为止。三. 仪器的校正1. 调节显示屏幕的亮度这可以通过调节MUSCU板上的R14元件来实现2. 检查同步性2.1 转动断路器轮把示波器的探针接在电路板MUSCU2的D29元件的第二个脚上测定信号的周期,正确的值应。该介于5.1ms-5.4ms之间。如果超出这个范围,可以通过调节CHOPT电路板上R3元件来校正。检测活动结束后要用带有颜色的漆锁定它的正确位置2.2 检查同步性A) 按“计算模式”键,选择1“调整”,再按“输入”键选择9“连续测量”,再按“输入”键两次选择增益0,并按“输入”键。B) 当在MACU2板D7元件的第14脚上测量信号的A/D转换时,测得的时段信号应该在信道的中间。如果不符,可以通过上下移动CHOPT板来调整。3. 调整时钟频率3.1 按“计算模式”选择1“调整”,再按“输入”选择10“时钟频率”,再按“输入”。3.2 用频率计数器在MUSCU板上的D28元件的第13脚处测定时钟频率,正确的值应该为fck=32768Hz。这可以通过调节该板上的电容器C4来校正。3.3 值得注意的是,在这个测定过程中不能用“停止”键中断这个过程。4. 存储机器的系列号按“计算模式”选择2“测试”,按“输入”选择4“重复性20次”,按“输入”键两次。输入机器号(353……),按“停止”两次。四. 仪器的检验1. 重复性:在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度即可重复性,可用CV值来表示。在某一特定的滤光片下测定某一块酶标板20次,用统计学方法求出所有测量值的均值和标准差。公式如下: 所有测量值的标准差CV %= -----------------------------×100%所有测量值的均值2. 精确性:待测物的测定值与一可接受的参考值之间的差异。此项指标需用雷勃公司标准板(PVT)来测。测量值 - 参考值精确性= ------------------
×100%参考值3. 光路检测:将一块酶标板正放测量一次,再将酶标板反放测量一次,查看同一孔吸光值是否相同,从而查看其所有光路8通道是否均一。3.1
查看光路上的透镜是否清洁。3.2
灯泡好否及亮度是否正常。3.3
滤光片是否清洁4. 载轨运动:开机后酶标仪能否自检,自检结束后揿“开始”,查看载轨运动是否正常及有无噪声。5. 按键膜的好坏:开机后试用所有按键膜,查看其功能是否完好。
范文九:一、 常见故障1、 打印机不工作(1) 酶标仪后部DIL开关设置不正确。DIL标准设置:左 下下下下下下上下 上上下下上下上上 右(人站在仪器后部,面向仪器)。(2) 酶标仪内置打印机开关处于开的位置。应在总参数中设置内置打印机为关。(3) 打印机接口接错(接在了计算机接口上了)。应将打印机联系接在DIL开关正下方的打印机接口上,RS-232接口为计算机接口。(4) 打印机联线有问题:有些配备的新打印机联线仍有问题,请确保打印机联线无问题。(5) 打印机未联机,请确认打印机上的联机键已联机。(6) 打印机无纸或纸未装好,请装好打印纸。(7) 有些打印机有开机顺序,有的需先开打印机,后开仪器;有的需先开仪器,后开打印机。2、 调不出所编程序必须在相应程序模块下调出。如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。3、 肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大3.1 滤光片设置不正确:请在“参数”中按滤光片轮中实际的情况设置滤光片。3.2 空白或阴性位置不正确。二、 仪器的检查测试1、 检测电源部分的输出电压电源部分输出电压可以通过检测MUSCU板上X11元件得到,每个点的正确对地电压应该是(顺序为从左至右):5V、0V(地电压)、15V、24V、-15V、0V。2、 光源电压的测试和调节测量光源电压,如果发现所测的结果不符合规定要求可以调节电源上的R39元件。其操作步骤如下:(1) 打开电源开关,使仪器处在工作状态。(2) 用电压表测量光源电压,正常电压应在6.7~6.9V之间。(3) 选择405nm波长的程序,按“开始”键,同时测量光源处电压,正常值应在7.5~8.1V之间。(4) 如果光源电压不正常,关闭电源开关。旋松测量部分上盖螺丝并移去上盖。(5) 旋松轨道部分的固定螺丝并移动轨道部分(要特别小心以防损伤轨道部分和主板及电源部分的连线!),能看到轨道下面的电源即可。(6) 打开电源开关,调节电源上R39元件,再重复上面步骤2测量光源电压,一直到正确为止。三、 仪器的校正1、 调节显示屏幕的亮度这可以通过调节MUSCU板上的R14元件来实现。2、 检查同步性(1) 转动断路器轮把示波器的探针接在电路板MUSCU2的D29元件的第二个脚上测定信号的周期,正确的值应该介于5.1ms~5.4ms之间。如果超出这个范围,可以通过调节CHOPT电路板上R3元件来校正。检测活动结束后要用带有颜色的漆锁定它的正确位置。(2) 检查同步性a) 按“计算模式”键,选择1“调整”,再按“输入”键选择9“连续测量”,再按“输入”键两次选择增益0,并按“输入”键。b) 当在MACU2板D7元件的第14脚上测量信号的A/D转换时,测得的时段信号应该在信道的中间。如果不符,可以通过上下移动CHOPT板来调整。3、 调整时钟频率(1) 按“计算模式”选择1“调整”,再按“输入”选择10“时钟频率”,再按“输入”。(2) 用频率计数器在MUSCU板上的D28元件的第13脚处测定时钟频率,正确的值应该为fck=32768Hz。这可以通过调节该板上的电容器C4来校正。(3) 值得注意的是,在这个测定过程中不能用“停止”键中断这个过程。4、 存储机器的系列号按“计算模式”选择2“测试”,按“输入”选择4“重复性20次”,按“输入”键两次。输入机器号(353……),按“停止”两次。四、 仪器的检验1、 重复性:在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度即可重复性,可用CV值来表示。在某一特定的滤光片下测定某一块酶标板20次,用统计学方法求出所有测量值的均值和标准差。公式如下:    所有测量值的标准差CV %= ————————————×100%      所有测量值的均值2、 精确性:待测物的测定值与一可接受的参考值之间的差异。此项指标需用雷勃公司标准板(PVT)来测。    测量值 - 参考值精确性= —————————— ×100%       参考值3、 光路检测:将一块酶标板正放测量一次,再将酶标板反放测量一次,查看同一孔吸光值是否相同,从而查看其所有光路8通道是否均一。(1) 查看光路上的透镜是否清洁。(2) 灯泡好否及亮度是否正常。(3) 滤光片是否清洁。4、 载轨运动:开机后酶标仪能否自检,自检结束后揿“开始”,查看载轨运动是否正常及有无噪声。5、 按键膜的好坏:开机后试用所有按键膜,查看其功能是否完好。
范文十:维普资讯 20 0 2年 1 0月 第 9 第 1 卷 0期 3 讨论   .实 用 医 技 杂 志 Ju n l f rci l dc l c nq e  o ra o  a t a Me i   h ius   P c  a TeO t ,0 2 V 11  N . 0 c. 2 0  o. 0 o 1 不 准 确 性 。 出生 天 数 不 同 , 胆 红 素 值 不 一 , 出 生 第 3 4天  ⑧ 血 以 、 值 较 高 , 危 儿 发 生 高 胆 红 素 血 症 发 生 率 高 。④ 操 作 快 捷 、 高 简  便 , 床医生 在查房或检 查患儿时 , 临 即可 知 道 患 儿 黄 疸 程 度 ,   以 便 及 时 处 理 , 别 适 合 于 基 层 医 院 作 为 常 规 广 泛 检 查 检 测 使  特用。  ( 稿 日期 : 0 2 0 — 2   收 2 0 — 71 )防 止 新 生 儿 高 胆 红 素 血 症 的 发 生 是 预 防 高 胆 红 素 脑 病 的  要 点 , 新 生 儿 高 胆 红 素 血 症 , 须 及 早 处 理 。 应 用 Hb 3 8 对 必 在 一 6  型 经 皮 胆 红 素 检 测 仪 中 , 如 下 优 点 : 检 测 值 准 确 、 靠 。②  有 ① 可 f 应 用 价 值 大 , 用 该 仪 器 可 无 创 性 地 动 态 观 察 新 生 儿 黄 疸  临床 应情 况 , 检 测 结 果 可 靠 , 服 了 以前 靠 静 脉 血 来 动 态 观 察 黄 疸  且 克 情 况 的 困难 及 不 可行 性 , 避 免 了靠 f 医 生 肉 眼 黄 疸 变 化 的  又 临床浅论 酶 标 仪 的 质  方 法 及 其 意 义  控丁 生 海 ( 西 州都 兰县预 防保 健 中心 , 海 都 兰 8 6 0 ) 海 青 l 1 0 [ 图 分 类 号 ]R 4 . 1 [ 献 标 识 码 ]B [ 章 编 号 ]17 —0 8 2 0 )07 50  中 4 6 6  文   文 6 15 9 (0 2 1- 6 —1自从 1 7   1年 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 ( l S 方 法 建 立 以 来 , 9 E   A) I  3讨 论 由于 其敏感性 高 , 异 性强 , 作简便 而得 到迅 速推广 , 时 , 特 操 同  相 关 的 各 型 酶 标 仪 也 应 运 而 生 并 得 到 快 速 发 展 。 生 部 卫 医 发  卫3 1 利 用 酶 标 仪 对 实 验 结 果 进 行 判 读 , 大 大 降 低 人 为 因 素  .  将 等 造 成 的 误 差 , 科 学 、 确 。 是 , 标 仪 质 量 的 优 劣 , 接 影  更 准 但 酶 直 响 到 实 验 结 果 的 准 确 性 。 从 以上 结 果 可 看 出 , 酶 标 仪 的 批 内  该 重 复 性 C 小 于 1% , 显 示 随 溶 液 浓 度 的 降 低 C 值 增 大 。 V 并 V  批 间 重 复 性 大 于 批 内重 复 性 , 零 点 漂 移 在 一 0 0 2 + 0 0 3 其 .0 ~ . 0  之 间 。 在 4 0 n 处 经 线 性 回归 分 析 , 果 r 0 9 8 , 良好  5  m 结 一 .96 呈( 95第 3 19 ) 2号 文 件 中 明 文 规 定 “ 标 试 剂 不 得 使 用 目测 法 判  酶 断 结 果 ” 因 此 酶 标 仪 的 质 量 优 劣 显 得 更 加 重 要 。本 文 通 过 对  , M ut k nMK3型 酶 标 仪 的 质 控 , 述 酶 标 仪 的 质 控 方 法 及 其  l sa   i 简重 要性 。  1 材 料 与 方 法 的 线 性 关 系 。除 批 间 重 复 性 因 其 他 因 素 导 致 偏 高 外 , 酶 标 仪  该批 内重 复性 、 定 性 、 性 均 符 合 其 技 术 指 标 要 求 , 合 于 板 式  稳 线 适 酶标试 剂的检测 。   3 2 酶联 免疫吸 附试 验 (lS 结果 准确与 否 , 酶标 仪 自 . E   A) I 与  1 1 材料 . 微孔板 ( 门新 创科技 有 限 公 司提供 , 底板 条 , 厦 平  孑 间差小 于 005 , 测溶 液 ( L . 0 A) 检 自配 不 同 浓 度 的重 铬 酸 钾 溶  液 ) 加 样 器 ( 兰 L b y tms 误 差 小 于 0 0 ) , 芬 a sse , .4 。   1 2 方 法  在 每 个 微 孔 内加 入 检 测 溶 液 2 0 I, 种 浓 度 加  . 0    每 3孔 。 器 操 作 严 格 按 操 作 说 明 操 作 , 测 在 4 0n 波 长 处 被  仪 检 5  m身 质 量 有 着 重 要 的关 系 , 新 购 置 的 酶 标 仪 进 行 质 量 鉴 定 和 定  对 期 对 使 用 的 酶 标 仪 进 行 质 量 监 控 是 保 证 实 验 结 果 准 确 的 重 要 步骤 。  表 l 批 内 重 复 性 检 测 测 溶 液 的吸 光 值 ( , 仪 器 的 批 内 重 复 性 、 间 重 复 性 、 定  A)从 批 稳 性 、 性等技 术指标进行 初步评价 。 线  2 结 果 2 1 批 内重 复 性 的 检 测 .仪 器 接 通 电源 后 预 热 3   i 0 r n时 , a 在 4 0n 处 对 3 不 同 浓 度 重 铬 酸 钾 溶 液 连 续 检 测 2 5  m 个 O次 , 取  读A 值 , 果 见 表 1  结 。 2 2 批 间 重 复 性 检 测  在 4 0n 处 对 3种 不 同 浓 度 检 测 溶  . 5  m液 连 续 检 测 2  读 取 A 值 , 果 见 表 2  0d, 结 。23 零 点漂移 .在 4 0n 处 以 蒸 馏 水 调 零 , 察 8h内 A 值  5  m 观  的 变 化 , 果 : , , , 。 , , , ,  结 0 1 2 3 4 5 6 7 8 h内 A 值 分 别 为 0 0 0 0 . 0 ,.  000, 0.0 + 02, 0 一 .O01, .000,+ 0 0 .00 + 0.0 3. 02, 0.O 一 01,一 0. 2。 00  2 4 线 性  在 4 0n 处 检 测 8 不 同浓 度 检 测 溶 液 , 取 A . 5 m 个 读  值 , 果 见表 3  结 。表 3 8个 不 同 浓 度 重 铬 酸 钾 溶 液 A 值 线 性 关 系   注 : 测 结 果 经 分 析 , 线 相 关 系数 r 0 9 8 , 线 回 归 方 程 y 0 0 0 5 . 9 1   检 直 - .96直 - . 3 3 +9 5 3 X ( 稿 日期 : 0 2 0 — 1  收 20 —70 )?76 ? 5  

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