国际公认的he急性肺损伤最新心肺复苏评分标准准有哪些

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下载所得到的文件列表肿瘤坏死因子-alpha中和对lps致ali小鼠肺组织保护性作用的研究.pdf
文档介绍：
博士学位论文肿瘤坏死因子一alpha中和对LPS致ALI小鼠肺组织保护性作用研究博士研究生:袁伟锋指导教师:黄文杰摘要研究背景和目的各种性质的肺刺激因素,如细菌感染、物理创伤、化学损伤等,均可通过活化炎症反应而引起肺组织损伤,当肺组织严重损伤时可发生急性呼吸窘迫综合征(Acute Respiratory DistressSyndrome,ARDS)。目前认为急性肺损伤(Acute LungInjury,ALI)是ARDS的早期阶段。在ARDS的早期阶段—一AI,I进行治疗, 中断ALI进程,将提高ARDS治疗的成功率。 ALI的发生、发展过程是炎症失控地放大的过程。因此,ALI的治疗不仅需要有效的抗感染疗法,而且需要对机体防御系统进行调控,下调过度的全身炎症反应及氧化应激,减少炎症细胞、炎症介质及氧自由基对肺组织结构细胞的破坏,维持呼吸系统功能。在炎症反应或氧化应激活化的过程中,肿瘤坏死因子.0【(Tumor NecrosisFactoralpha,TNF-a)起着重要作用。 TNF.a的生成主要由核因子kappa B(Nuclear FactorkappaB。NF.1出)调控。当促炎因子刺激炎症细胞后,NF.1cB活化发生核易位,与r,B序列结合,启动TNF-(I 的表达。致炎因素引枷.心首次活化与TNF.a释放,此部分TNF-(I与炎症细胞的n吓受体(TNF Receptor,TNFR)结合,再次活化NF.佃},通过正反馈机制放大炎症反应。TNF-a除可以激活NF.1出信号通路,还可以激活JNK,介导细胞凋亡,或激活氧化应激信号途径,活化NADPH氧化酶、一氧化氮合酶等氧化酶, 中文摘要促进内源性氧自由基生成,氧化细胞成份,破坏细胞的生理功能。上述因素的综合性损伤引起肺组织细胞凋亡与肺结构破坏。血清或肺泡灌洗液中TNF=(1浓度与ALI严重程度呈正相关,因此通过下调游离TNF.a浓度是控制炎症与氧化性损伤及降低ALI危害的策略。使用药物中和游离TNF.a是降低TNF-(】t浓度的有效、易行方法。到目前为止, 已开发的中和TNF-(1的药物主要有两大类,分别为TNF受体融合蛋白(TNFR-Fc),即TNFR与Ig G的Fc段所形成的融合蛋白和人源化的抗TNF=ot单抗,前者代表性的商品化药物有依那西普,后者有英利昔单抗,二者均可与TNF.a 结合,抑制其与受体结合而中和其生物活性。上述两类药物普遍用于TNF.a分泌异常引起的免疫性疾病,如类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、Crohn病等。虽然上述药物目前仅用于非感染性疾病,但作为有效下调血清TNF.a的药物,TNF.a 中和策略能否有效减轻感染诱发的肺组织损伤仍存争议。本研究将复flj)JLPS致AM/J,鼠模型,探讨TNFR-Fc对减轻ALl病理生理过程中炎症反应损伤、氧化损伤及肺组织细胞凋亡的作用及机制。首先比较腹膜腔注射LPS与气管内滴入LPS致ALId、鼠模型的差异,选择对研究中和TNF.a保护肺组织合适的动物模型,并在此基础上分别研究中和TNF.Q对肺组织炎症反应强度、氧化损伤与组织细胞凋亡的影响,探讨TNF.a中和策略用于ALI的可行性。研究方法 1 气管内滴入LPS与腹膜腔注射LPS致小鼠ALI模型的特征比较小鼠随机分为3组,气管内滴入LPS(LPS intratrachealadministration,rr) 组小鼠分离暴露气管后从气管内滴入LPS溶液,腹膜腔内注射LPS(LPS intraperitonealadministration)组小鼠腹膜腔内注射LPS溶液,对照组小鼠不给予LPS处理。分别在第0、l、2、6、12、18、24、48小时取样进行检测。小鼠进行支气管肺泡灌洗,灌洗液离心后取上清,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中蛋白含量与TNF.a浓度;腹主动脉取血离心分离血清,ELISA法检测血清博士学位论文 TNF-.1x浓度;小鼠开胸取肺,称量肺组织干燥前后重量并计算肺组织湿/干重比例;取肺前冲洗肺组织血管床后福尔马林固定,石蜡包埋切片与HE染色,通过急性肺损伤评分比较IT组与P组、对照组小鼠肺组织破坏程度。 2 n吓R-Fc对ALI小鼠肺组织的保护作用选用气管内滴入LPS的方法复制LPS致ALI小鼠模型。小鼠分为LPS组、 TNFR-Fc+LPS组与对照组。LPS组仅气管内滴入LPS溶液;TNFR.Fc+LPS组在LPS滴入前24小时腹腔注射TNFR-Fc进行预处理;对照组小鼠气管内滴入与LPS溶液等体积的生理盐水。分别在LPS或生理盐水滴入后第0、0.5、1、2、 4、6小时进行检测。腹主动脉取血,离心取血清,ELISA法检测血清TNF.a浓度;小鼠进行支气管肺泡灌洗,灌洗液离心后取上清,BCA法检测BALF中蛋白含量;取肺组织测量湿/干重比例;肺组织冲洗血管床后福尔马林固定,石蜡’包埋切片,HE染色后肺组织病理评分检测肺组织损伤程度,TUNEL法检测肺组织凋亡程度。 3 TNFR-Fe对炎症反应及转导通路的影响气管内滴入LPS复制ALI小鼠模型,分组处理同上。ELISA法检测BALF 与血清中IL·lD、IL-6、IL一10、IFN-'f浓度:肺组织匀浆后抽提总RNA,real-time RT-PCR检测肺组织TNF.a与NF.r.B基因转录强度变化;肺组织匀浆后抽提肺总蛋白,WesternBlot检测肺组织Erk、p38、JNK的磷酸化程度。 4 TNFR-Fe对ALI小鼠肺组织氧化损伤的影响气管内滴入LPS复制ALI小鼠模型,分组处理同上。肺组织匀浆后抽提总 RNA,real.time RT-PCR检测肺组织iNOS、Noxl、Nox2、Nox4、XO、SOD等氧化酶的基因转录强度变化;抽提肺组织总蛋白,比色法检测肺组织MDA含量与总抗氧化能力。 nI 中文摘要结果气管内滴入LPS与腹膜腔注射LPS致小鼠ALI模型的特征比较 1.1IT组与m组小鼠在LPS滴入后BALF/血清TNF.伍浓度与对照组相比均显著升高(BALF:P均&0.020;血清:P均&0.001),呈先升高后下降趋势, 但IT组与m组比较无显著差异(BALF:P--0.075;血清:P--0.755)。 1.2IT组与m组小鼠在LPS滴入后BALF中蛋白含量与对照组相比均显著升高(P均&0.001),呈先升高后下降趋势,但IT组与m组比较无显著差异(P---0.545)。 1.3IT组与IP组小鼠在LPS滴入后肺湿/干重比例与对照组相比显著升高(P均&O.001),呈先升高后下降趋势,但IT组与Ⅲ组比较无显著差异(P---0.009)。 1.411r组小鼠在LPS滴入后2h肺组织切片尚可辨认出肺泡结构,但肺泡间隔增厚,炎细胞浸润,6h肺泡结构已破坏,24h无法辨认肺泡结构,肺内大量炎细胞浸润,以中性粒细胞为主;伴出血与水肿形成;P组肺组织损伤较IT组轻,各时间点均可辨认肺泡结构,但肺泡间隔增厚,中性粒细胞浸润,主要见于间隔及间隔内血管,部分肺泡腔内有少量渗出;对照组小鼠肺组织结构清晰, 肺泡壁薄,肺泡1
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超声诊断急性肺损伤及急性呼吸窘迫综合征的价值
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&&目的：评价超声诊断急性肺损伤及急性呼吸窘迫综合征(ALI／ARDS)的价值。材料和方法：研究对象为41例呼吸困难的患者,根据动脉血氧分压与吸氧浓度的比值(PaO2／FiO2)分为ALI组(16例)和ARDS组(25例);对照组50例,临床及X线胸片检查正常。用超声按12个肺区扫查肺野。结果：ALI／ARDS患者的胸部超声表现包括彗星尾征、实变及胸腔积液。ALI组,弥漫性彗星尾征或实变范围≤5
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急性肺损伤研究进展
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三种大鼠急性肺损伤模型的比较
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