利福平耐药基因检测快速检测是当日痰吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-05-16 20:49 标签： 利福平耐药还能治愈吗
年以前，全球使用固体培养和药敏试验技术（传统药敏试验）进行实验室MTB耐药诊断，传统药敏试验可检测一线抗结核药物（异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素）和二线抗结核药物（卡那霉素、氧氟沙星等）的耐药情况，结果较可靠，价格便宜，但所需时间较长，约2-3个月［1-2］。为了提高耐药诊断速度，世界卫生组织-年陆续推荐了多种新技术，如液体培养和药敏试验技术（液体药敏试验）、分子生物学快速耐药检测技术［包括线性探针（LPA）、自动化Gene-Xpert等技术］。液体药敏试验将耐药诊断时间缩短到1个月时间，可检测一线抗结核药物（异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素）和二线抗结核药物（卡那霉素、氧氟沙星等）的耐药情况，结果较可靠，但价格较贵，且容易污染［3］。线性探针技术检测耐药需6小时，适用于涂阳痰标本和培养菌株，适合地市及以上级别实验室使用，但价格较贵，仅能用于异烟肼和利福平的耐药性检测［2，4］。自动化Gene-Xpert技术检测耐药需90分钟，操作简便，可在县级实验室使用，适用于涂阳和涂阴痰标本（目前国内注册仅对涂阳肺结核进行耐药检测），但价格较贵，仅能检测利福平耐药［5-6］。总之，不同的耐药检测技术各有优缺点，且不能相互替代。一、MTB耐药诊断流程全球基金结核病项目为31个省、1/3地市、1/3县配备了传统药敏试验设备和台分子生物学快速耐药检测设备（包括线性探针和自动化Gene-Xpert等）。目前许多实验室己配备了多种耐药检测设备，如果同时使用，不但浪费资源，且检测结果不一致，给医生的诊断和化疗方案制定带来许多困惑。因此，有必要制定MTB耐药诊断流程，充分发挥分子生物学快速耐药检测技术和细菌学药敏试验优势。国家结核病预防控制中心根据不同耐药检测技术制定了MTB耐药诊断流程，并经过专家论证后在中盖结核病项目和全球基金项目地区推广使用。1.线性探针技术和传统（或液体）药敏试验联用耐药诊断流程：医院、疾病预防控制中心将涂阳肺结核患者的3个痰标医院，实验室先采用线性探针技术检测，检测结果为利福平敏感时不再进行传统（或液体）药敏试验；检测结果为利福平耐药时再取这些患者痰标本进行二线传统（或液体）药敏试验，检测是否为广泛耐药结核病。需要特别注意的是，耐药非高危人群（新涂阳肺结核）第1次快速耐药检测为利福平耐药时，必须采集另1份涂阳痰标本进行复查，如果第2次快速耐药检测仍为利福平耐药，则可诊断为利福平耐药；如果第2次快速药敏检测为利福平敏感，则诊断为利福平敏感；如果未行第2次快速药敏检测，仅1次利福平耐药结果则视为利福平敏感。2.Gene-Xpert技术和传统（或液体）药敏试验联用诊断流程：县级实验室采用Gene-Xpert技术对涂阳肺结核患者进行耐药检测，如果检测结果为利福平耐药，应将痰标医院进行异烟肼、氧氟沙星、卡那霉素传统（或液体）药敏试验。需要特别注意的是，耐药非高危人群第1次Gene-Xpert检测为利福平耐药时，必须采集另1份涂阳标本进行复查，如果第2次Gene-Xpert（或LPA）检测为利福平耐药，则可诊断为利福平耐药；如果第2次Gene-Xpert（或LPA）检测为利福平敏感，则诊断为利福平敏感；如果未行第2次Gene-Xpert（或LPA）检测，则视为利福平敏感。二、为什么以利福平耐药与否进行分类？世界卫生组报道，80%以上利福平耐药的结核病患者同时耐异烟肼，即绝大多数利福平耐药患者为耐多药结核病（MDR-TB）患者［7］。中国-年耐药基线调查结果显示，86%的利福平耐药患者为MDR-TB［8］。利福平耐药患者通常需要二线抗结核药物治疗，而利福平敏感患者通常使用一线抗结核药治疗即可［2］。所以，以利福平耐药与否进行分类对于制定化疗方案非常重要。三、为什么对非高危人群利福平耐药患者必须进行第2次确认？阳性预测值（PPV）指筛查阳性者患病的概率，阴性预测值（NPV）指筛检阴性者无病的概率。阳性预测值和阴性预测值受两类因素的影响，一类是所筛查人群的该病患病率，另一类是筛查方法本身的特异度和敏感度。当特异度和敏感度不变时，患病率与阳性预测值成正比，而与阴性预测值成反比。但阳性预测值对患病率变化非常敏感，而阴性预测值则不太敏感。当患病率低时，阳性预测值低，容易出现错误的阳性诊断［9］。假设某地市使用线性探针技术对例新涂阳肺结核患者进行MTB耐药检测，敏感度为96%，特异度为97%，数据模型见图1。图1不同利福平耐药率人群的阳性预测值测算模型-年全国耐药基线调查显示，新涂阳肺结核利福平耐药率6.7%，复治涂阳肺结核患者利福平耐药率为29.4%［8］，由于新涂阳肺结核利福平耐药患病率低，阳性预测值也低（70.7%），对这些患者进行第1次检测诊断出的95例利福平耐药患者中28例属于错判，应为利福平敏感的患者。利福平敏感患者口服6-8个月一线抗结核治疗可达到90%及以上的治愈率,而MDR-TB患者24个月治疗方案全球成功率仅为48%［10］,所以对新涂阳肺结核患者使用快速耐药检测作出利福平耐药或MDR-TB诊断时应特别谨慎。应对第1次检测出的95例利福平耐药患者的另1份痰标本进行第2次检测,通过第2次线性探针试验,27例错判为利福平耐药的患者得到了纠正,应为利福平敏感患者,这样大大减少了错判和错误治疗。(参考文献略)（原文见中华结核和呼吸杂志，年6月，第39卷第6期）作者单位中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心赞赏长按
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让结核&检测并等待&成为&检测就治疗&，我院检验科成功开展Xpert MTB/RIF（结核分支杆菌/利福平）耐药基因快速检测。
结核病是由结核分枝杆菌所引起的严重危害人民健康的慢性传染病，根据WHO 2015年的世界结核病报告，我国结核估算发病120万，是全球发病人数居第二位的国家，在耐多药结核方面，估算发病6.2万，但报告发病人数只有0.58万，纳入治疗的则有0.28万，因此&不充分病人发现、不充足耐药治疗&是我国结核防控迫在眉睫需要解决的问题，而快速、准确的结核及耐药结核诊断是亟需解决的第一环。
1、随时随地的结核检测
Xpert MTB/RIF是一项可在2小时内从患者标本中直接检测出是否含有结核分枝杆菌及是否对利福平耐药的分子诊断试验。
2、明显缩短就诊到治疗的时间，患者和医生都无需等待。
我国结核病传统的实验室诊断是涂片镜检和培养：涂片镜检虽然时间相对较快，但其灵敏度只有50%左右，同时也不能区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌，因此涂片镜检结果并不可靠；培养作为当前结核分枝杆菌检测的金标准，结果相对可靠，但是要获得临床决策所需的检验报告，需要耗时4-8周，造成大量患者脱落以及耐药患者的漏诊，这也是前面所述&不充分病人发现、不充足耐药治疗&的最重要的原因。
3、准确预测活动性结核
对临床决策而言，检测结果仅仅是快还不够，准确的结果才能为其提供可靠的依据，灵敏度和特异性分别达到92%和97%，在快速给出检测结果的同时，其结果准确度也是高度可靠。
目前，我院是云南省第三家开始检测此项目的医院，诊断及药敏2小时取报告，准确、快速！该项目的引进让红河州结核患者不用离开红河州本地就能享受到一流的检测。
检测咨询：红河州第一人民医院检验科微生物实验室
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痰耐药结核分枝杆菌rpoB基因的快速检测及利福平耐药机制研究
优质期刊推荐342例痰培养阳性肺结核菌株耐药特征分析(R)医学论坛网-网聚医学的力量
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342例痰培养阳性肺结核菌株耐药特征分析
&&&&&&&&&近期，安庆市疾病预防控制中心张志平等研究了342例痰培养阳性肺结核菌株耐药特征分析，研究发现，复治肺结核患者作为重点人群筛查是一种高效的耐多药筛查策略;快速检测利福平耐药可以作为耐多药肺结核患者初步诊断的重要依据。该文章发表于2015年03期《现代预防医学》上。 该研究旨在了解肺结核患者对利福平、异烟肼、氧氟沙星、卡那霉素四种药物耐药分布情况,为肺结核的临床治疗与预防控制提供依据。 研究者们选取
&&&&&&&&近期，安庆市疾病预防控制中心张志平等研究了342例痰菌株特征分析，研究发现，复治肺结核患者作为重点人群筛查是一种高效的耐多药筛查策略;快速检测利福平耐药可以作为耐多药肺结核患者初步诊断的重要依据。该文章发表于2015年03期《现代预防医学》上。
&&&&&&&&该研究旨在了解肺结核患者对利福平、异烟肼、氧氟沙星、卡那霉素四种药物耐药分布情况,为肺结核的临床治疗与预防控制提供依据。
&&&&&&&&研究者们选取对年分离的结核分枝杆菌培养,采用比例法进行利福平、异烟肼、氧氟沙星、卡那霉素药敏试验,并分析耐药分布情况。
&&&&&&&&结果显示，342例结核菌株耐药率为31.3%,耐多药率为20.5%。初治和复治患者耐药率分别为12.2%和70.5%,耐多药率分别为2.6%和57.1%,差异均有统计学意义。男性(占17.2%)女性(占30.9%)之间耐多药差异有统计学意义。耐多药率有随年龄增长而下降的趋势。耐任何抗结核药物以异烟肼(25.2%)、利福平(21.9%)、氧氟沙星(18.7%)等为主。复治患者耐&1种药物、任何耐异烟肼、任何耐利福平、任何耐氧氟沙星、耐&2药物和耐多药均高于初治患者。复治耐多药肺结核患者特征构成主要为复治失败(42.2%)、初治失败,6种治疗结局的分布不均衡,差异有统计学意义。任何耐利福平和任何耐异烟肼患者,耐多药和多耐药的比例分别为97.3%和81.4%,差异有统计学意义。
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