甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化表观遗传机制的探讨--《中国疾病预防控制中心》2010年硕士论文
甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化表观遗传机制的探讨
【摘要】：
甲基丙烯酸环氧丙酯(Glycidyl Methacrylate,简称GMA)作为一种聚合用单体,具有良好的防紫外、耐水和耐热等特性,在树脂、涂料、粘合剂、塑料工业中得到广泛应用。已有研究显示,GMA具有致突变性,并可诱导BALB/C 3T3细胞、金仓鼠细胞(SHE)、正常人胚肺成纤维(KMB-13)细胞等多种哺乳类细胞发生恶性转化,具有潜在致癌性。
表观事件的发生与肿瘤的发生发展密切相关,对肿瘤的诊断和治疗具有重要意义。表观遗传学研究的是基因序列不发生改变的可遗传改变,主要通过DNA甲基化和组蛋白甲基化修饰控制细胞的增殖和分化、维持机体的稳定。其中,DNA甲基化作为肿瘤“二次打击”经典假说的重要补充,已经成为新的研究热点之一。大量实验表明,DNA甲基化水平和模式的紊乱在肿瘤发生发展的不同阶段广泛存在,故研究不同时期基因的表达改变及甲基化状态有着极其重要的意义。
细胞体外转化试验是研究各种理化因素致癌机制的有效方法。16HBE(human bronchial epithelial cells)细胞是经SV40 Large T抗原永生化的人支气管上皮细胞系,具有正常人呼吸道上皮细胞的形态和功能,该细胞体外易于培养,且裸鼠体内无致瘤性,以其作为转化试验的靶细胞可克服种属和组织学差异,模拟体内细胞受致癌原作用后向肿瘤细胞演变的过程。
本研究选用16HBE细胞作为靶细胞,在建立低浓度GMA多次染毒诱导16HBE细胞恶性转化模型的基础上,采用“人类全基因组表达谱芯片”分析恶性转化过程中甲基化相关基因的表达差异,并利用实时定量PCR对部分差异表达基因进行验证,同时采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测转化不同阶段肿瘤相关基因的甲基化状态,探讨GMA诱导16HBE细胞发生恶性转化的表观遗传机制。
1.GMA致16HBE细胞恶性转化过程中DNA甲基转移酶及甲基化CpG结合蛋白家族基因表达差异分析
1.1基因芯片筛选DNA甲基转移酶及甲基化CpG结合蛋白家族表达差异基因
利用“人类全基因组表达谱芯片”对转化前期(第10代)和转化后期(第30代)细胞的甲基转移酶及甲基化CpG结合域蛋白家族基因的差异表达进行分析,其中甲基转移酶基因包括DNMT1、DNMT3A及DNMT3B,甲基化CpG结合蛋白家族基因包括MBD1、MBD2、MBD3、MBD4、MECP2、Kaiso,结果显示在转化前期细胞中DNMT1、MBD1、MBD3基因与同代龄DMSO溶剂对照组细胞比较信号比值Ratio≥2,表达均上调,其余基因表达未见无明显差异；转化后期细胞中各基因表达与同代龄DMSO溶剂对照组细胞比较均未见明显差异。
1.2 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中DNMT1及MBD1基因表达改变
对转化前期细胞中DNMT1、MBD1 mRNA表达情况进行进一步研究分析,结果显示：与同代龄DMSO溶剂对照组细胞比较,转化前期细胞中DNMT1及MBD1基因表达分别上调80.60%、79.10%,与芯片结果一致。提示DNA甲基化在细胞恶性转化过程中起着不容忽视的作用,推测DNMT1高表达是GMA致16HBE细胞恶性转化的早期分子事件,DNMT1及MBD1基因可能是多个甲基化相关基因转录表达下调的关键调控点。
2.GMA致16HBE细胞恶性转化过程中肿瘤相关基因表达差异分析及DNA甲基化状态的研究
2.1 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中肿瘤相关基因表达差异分析
采用“人类全基因组表达谱芯片”对转化前期、转化后期细胞中肿瘤相关基因表达进行动态分析,结果显示：与DMSO溶剂对照细胞比较,CACNA2D3.LRRC4基因在转化前期、转化后期细胞中表达均下调(0Ratio≤0.5); CTGF基因在转化前期细胞中表达上调而转化后期细胞中表达下调；H19、THBS1基因在转化后期细胞中表达下调。
2.2 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中肿瘤相关基因甲基化状态分析
在以往GMA潜在致癌性研究基础上,根据基因表达差异的程度以及相关文献提供的线索,我们挑选了8个基因(P16、APC、LRRC4、H19、hMSH2、MGMT、CTGF、THBS1),对转化早期(染毒结束)、转化前期、转化后期细胞中这8个基因的甲基化状态进行检测,结果显示P16基因在GMA致16HBE细胞恶性转化不同阶段均出现甲基化现象,可以考虑将其作为GMA致16HBE细胞恶性转化的一个早期敏感指标；hMSH2、CTGF、THBS1基因在转化不同阶段均未出现甲基化现象,提示其并非GMA致16HBE细胞恶性转化的敏感基因；APC、MGMT基因溶剂对照与GMA组均出现不同程度的甲基化,故推断其并非GMA致16HBE细胞恶性转化的特异性基因；LRRC4、H19基因正常对照、溶剂对照与GMA组均出现不同程度的甲基化,其原因尚需进一步研究分析。
综上所述,本研究分析了GMA致16HBE细胞恶性转化过程甲基化相关基因的表达差异,并检测了恶性转化不同阶段部分肿瘤相关基因的甲基化状态。结果提示DNA甲基化可能是GMA致16HBE细胞发生恶性转化的一种重要机制；DNMTl及MBD1基因是多个甲基化相关基因转录表达下调的关键调控点,其表达改变可能与肿瘤相关基因的甲基化状态相关,而肿瘤相关基因在不同时期的甲基化状态可作为肿瘤发生发展的一个敏感指标,本研究工作为探讨GMA致癌机制及早期分子标志物的筛选提供了基础,同时也为GMA致癌危险度评定、开展分子流行病学监测、制定卫生标准以及职业肿瘤的防治等实际工作提供参考资料。
【关键词】：
【学位授予单位】：中国疾病预防控制中心【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R730.2【目录】：
中文摘要5-8
英文摘要8-11
英文缩写词表11-12
技术路线15-16
第一部分 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中DNA甲基转移酶及甲基化CpG结合蛋白家族基因表达差异分析16-37
第一节 基因芯片筛选DNA甲基转移酶及甲基化CpG结合蛋白家族表达差异基因18-27
1 材料与方法18-22
2 结果22-25
3 讨论25-27
第二节 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中DNMT1及MBD1基因表达改变的研究27-36
1 材料与方法27-31
2 结果31-33
3 讨论33-36
第一部分 小结36-37
第二部分 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中肿瘤相关基因表达差异分析及DNA甲基化状态的研究37-58
第一节 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中肿瘤相关基因表达差异分析38-41
1 材料与方法38
2 结果38-39
3 讨论39-41
第二节 GMA致16HBE细胞恶性转化过程中肿瘤相关基因甲基化状态的研究41-57
1 材料与方法41-45
2 结果45-51
3 讨论51-57
第二部分 小结57-58
1 主要研究结果58-59
2 本研究解决的关键问题59
3 研究的创新点和应用可行性59
4 后续研究设想59-60
参考文献60-65
发表文章66-83
个人简历83
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式
【参考文献】
中国期刊全文数据库
刘莉莉,陈家,安社娟,吴中亮;[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
董琳;李瑛;王全凯;孙金秀;许建宁;;[J];癌变.畸变.突变;2009年01期
王洁如,李小玲,范松清,谭琛,向娟娟,唐珂,王蓉,李桂源;[J];癌症;2003年09期
张功员;刘秋亮;乐晓萍;丁一;张钦宪;;[J];第四军医大学学报;2007年11期
张文,孙玉鹗,蔡庆,卢光明;[J];中国肺癌杂志;2003年05期
姚群峰;[J];国外医学(分子生物学分册);2003年03期
李瑛;许建宁;;[J];国外医学(卫生学分册);2008年01期
余小平;张媛;凌文华;;[J];国际遗传学杂志;2006年03期
杨娜;李智;;[J];国际遗传学杂志;2007年06期
武明花;李小玲;黄琛;唐运莲;张祖平;李桂源;;[J];中南大学学报(医学版);2007年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库
王李伟,仲伟鉴,应贤平,周永贵,周祥凤;[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
董琳;李瑛;王全凯;孙金秀;许建宁;;[J];癌变.畸变.突变;2009年01期
许建宁;林飞;;[J];癌变.畸变.突变;2010年02期
董琳;胡洁;王全凯;李军延;王健;谢广云;孙金秀;许建宁;;[J];癌变·畸变·突变;2010年04期
胡洁;王全凯;董琳;孙金秀;谢广云;王健;许建宁;;[J];癌变·畸变·突变;2010年05期
赵江平,崔晓红,周慈;[J];安防科技;2004年05期
闫晶晶;屈艾;刘小燕;贾蓉;;[J];安徽农业科学;2011年17期
陈全胜;[J];安徽预防医学杂志;2004年04期
戴震;范琼;;[J];安徽预防医学杂志;2005年06期
王洁如,李小玲,范松清,谭琛,向娟娟,唐珂,王蓉,李桂源;[J];癌症;2003年09期
中国重要会议论文全文数据库
朱晓俊;陈永青;李涛;;[A];2011·中国绝热节能材料协会年会论文集[C];2011年
苏建中;;[A];第十四届海峡两岸及香港、澳门地区职业安全健康学术研讨会暨中国职业安全健康协会2006年学术年会论文集[C];2006年
朱一川;张晶;周文刚;毕昕;;[A];中国职业安全健康协会2007年学术年会论文集[C];2007年
易娟;李添娣;张文;蔡金敏;林怡然;贠建培;;[A];2010广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2010年
邹梓;林剑;陈娟;唐从国;林庆华;;[A];首届贵州环境影响评价论坛论文选编[C];2008年
杨荣兴;庄志雄;蒋海青;何家禧;徐新云;吴斌;李戈怡;;[A];第五届广东省环境诱变剂学会暨第三届广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术交流会论文集[C];2006年
高勇;杨小丰;;[A];中国城市燃气学会应用专业委员会2005年会论文集[C];2005年
沈哲强;;[A];上海市制冷学会2009年学术年会论文集[C];2009年
戴英健;谢长城;付家胜;何舰;罗宽能;崔瑞华;;[A];湖南省预防医学会劳动卫生专业委员会2008年学术交流会议论文集[C];2008年
吴志伟;李淑敏;;[A];湖南省预防医学会劳动卫生专业委员会2010年学术交流会议论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库
谢冰;[D];吉林大学;2011年
李男男;[D];吉林大学;2011年
舒艺;[D];华中科技大学;2011年
季佳佳;[D];华中科技大学;2011年
孙爱军;[D];南开大学;2011年
胡云平;[D];复旦大学;2003年
汤绍辉;[D];暨南大学;2004年
潘世扬;[D];南京医科大学;2005年
雷立健;[D];复旦大学;2005年
陈波;[D];复旦大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库
宋磊;[D];南京医科大学;2010年
周丽丽;[D];郑州大学;2010年
史华星;[D];华东理工大学;2011年
王巍伟;[D];石河子大学;2010年
蒋明辉;[D];东华大学;2010年
漆雁;[D];中北大学;2011年
杜霞;[D];中南大学;2011年
赵乾魁;[D];复旦大学;2011年
宋志明;[D];南昌大学;2011年
胡兴;[D];南昌大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库
程书钧,冯杰,白谨峰,郭素萍,李秀琴,何其傥;[J];癌变.畸变.突变;1989年00期
高凤鸣;[J];癌变.畸变.突变;1989年00期
左瑾,高惠兰,谢大英,方福德;[J];癌变.畸变.突变;1991年04期
谢大英,张伟,孙文庆,高惠兰,李忠生,许建宁,方福德;[J];癌变.畸变.突变;1992年05期
纪卫东,吴中亮,陈家堃;[J];癌变.畸变.突变;2002年01期
杨俊保，谢大英，左瑾，许建宁，方福德;[J];癌变.畸变.突变;1994年01期
王洁如,宾亮华,钱骏,张小慧,向娟娟,唐珂,李伟芳,李桂源;[J];癌症;2001年07期
葛世丽,楼铁柱,项晓琼,陈伟,吴德昌;[J];癌症;2001年09期
潘锵荣,张行,许则丰,郑树;[J];癌症;2002年02期
王洁如,李小玲,范松清,谭琛,向娟娟,唐珂,王蓉,李桂源;[J];癌症;2003年09期
【相似文献】
中国期刊全文数据库
吕艺;刘淑红;葛学铭;范明;;[J];感染.炎症.修复;2002年04期
李有杰;张帅;王萍玉;高宗华;王秀文;谢书阳;;[J];实用儿科临床杂志;2010年21期
赵京禹;陈伟;葛世丽;周岗;姜笃银;孙同柱;付小兵;;[J];感染.炎症.修复;2003年04期
汪进,何放亭,曾志雄,方宏勋,肖培根,韩锐,杨梦甦;[J];药学学报;2005年12期
崔亚南;薄丽华;薛立娟;杨绍娟;卜丽莎;高申;;[J];吉林大学学报(医学版);2007年01期
吴志远;罗少军;江黎明;;[J];齐齐哈尔医学院学报;2007年21期
刘莉;佘义;赵卫东;李进;王芹;田丽丽;姜恩海;;[J];中国职业医学;2008年06期
董琳;胡洁;王全凯;李军延;王健;谢广云;孙金秀;许建宁;;[J];癌变·畸变·突变;2010年04期
段志凯;刘建功;郭万龙;张淑贤;;[J];中国职业医学;2011年01期
蔡瑜,沈锡中,王吉耀;[J];中华消化杂志;2003年10期
中国重要会议论文全文数据库
王福贞;曾晓荣;杨艳;刘智飞;周文;李妙龄;裴杰;;[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年
宫喜魁;赵琦;;[A];2011年空间生命与生命起源暨航天医学工程学术研讨会论文集[C];2011年
江新梅;;[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年
陈大庆;朱烈烈;李永领;林露阳;张荣;;[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
陈大庆;朱烈烈;李永领;林露阳;张荣;;[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
张继红;梁力建;黄洁夫;;[A];第十二届全国肝癌学术会议论文汇编[C];2009年
何晖;何娟;翟明;;[A];第一届全国难治性淋巴瘤学术研讨会暨第二届全国多发性骨髓瘤学术研讨会（国家级血液系统恶性肿瘤继续医学教育学习班）继续教育集[C];2007年
张瑜;曾晓荣;杨艳;张标;刘智飞;李妙龄;周文;裴杰;;[A];中国生理学会第五届全国心血管、呼吸和肾脏生理学学术会议论文摘要汇编[C];2005年
张标;曾晓荣;杨艳;张瑜;刘智飞;李妙龄;周文;裴杰;;[A];中国生理学会第五届全国心血管、呼吸和肾脏生理学学术会议论文摘要汇编[C];2005年
陈大庆;;[A];第一届长三角地区创伤学术会议论文汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库
陈列欢;[N];医药经济报;2005年
匡远深;[N];健康报;2008年
胡德荣;[N];健康报;2010年
中国博士学位论文全文数据库
李敏;[D];复旦大学;2012年
白莹;[D];中国农业大学;2014年
胡继红;[D];昆明医科大学;2013年
陈荣;[D];河北医科大学;2014年
万民熙;[D];中南大学;2012年
李江夏;[D];山东大学;2009年
吴磊;[D];中国农业大学;2014年
徐琪;[D];扬州大学;2012年
潘德思;[D];中国协和医科大学;1999年
袁力赟;[D];上海交通大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库
陈小慧;[D];南京医科大学;2009年
叶树娥;[D];西南大学;2014年
马瑞;[D];黑龙江大学;2014年
贾岩峰;[D];天津医科大学;2012年
孔祥宾;[D];苏州大学;2010年
李素雅;[D];河南农业大学;2011年
刘观良;[D];国防科学技术大学;2010年
冀中鹏;[D];昆明医科大学;2013年
毛志敏;[D];昆明医科大学;2013年
王李华;[D];浙江大学;2001年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 知识超市公司
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
订购热线：400-819-82499
服务热线：010--
在线咨询：
传真：010-
京公网安备75号工具类服务
编辑部专用服务
作者专用服务
环氧功能化丙烯酸酯共聚物的制备及改性研究
在过去,由于市场需求的作用,传统的溶剂型涂料因其良好的综合力学性能和表面性能一直受到青睐.近年来,许多国家相继颁发了有关控制挥发性有机化合物(VOC)的法令.在这种背景下,水性涂料得到了迅猛的发展.其中水性聚丙烯酸酯涂料由于其使用性能的优异,受到了广泛的重视.由于水相的引入,与溶剂型丙烯酸酯涂料相比,水性丙烯酸酯的制备具有更高的难度.现今的水性涂料与传统溶剂型涂料相比,在综合性能上存在着较大的差距.国外对水性丙烯酸酯的研究近年来取得了迅猛的发展,对水性丙烯酸酯的制造和其化学行为提出了许多新的见解,并且通过共聚合的方法制备出了性能优良的水性聚丙烯酸酯共聚物涂料.不仅如此,在丙烯酸酯共聚物中,功能基团的引入大大提高了水性丙烯酸酯共聚物乳液性能和涂膜性能.该文通过核/壳乳液聚合的方法,制备了环氧功能化丙烯酸酯三元共聚物乳液,功能化的环氧基团是通过与甲基丙烯酸环氧丙酯共聚反应而制得的.采用丙烯酸丁酯与甲基丙烯酸甲酯共聚合体系制备稳定的水性共聚物乳液,以满足丙烯酸类涂料无毒、无味、无污染等环保的要求;通过核/壳乳液聚合的方法控制乳胶粒结构和粒径大小,期望得到纳米级乳胶粒子;同时通过共聚合的方法,发挥软硬单体各自性能上的优点,互补性能上的不足之处;还希望通过带环氧基团的功能单体的引入,改善水性共聚物乳液的各方面性能,满足实际应用需要.共聚物乳液采用红外光谱FTIR和DSC曲线进行了定性表征,研究并表征了共聚乳液的稳定性和流变性等方面的特性.对共聚物乳液的结构特征,是通过傅立叶红外光谱FTIR图和示差扫描量热法的DSC曲线加以研究,并从共聚物乳液乳胶粒子的形态学的角度,分析了乳胶粒子的核/壳结构.DSC曲线表现出的两个共聚物的玻璃化温度说明,乳胶粒的核结构和壳结构表现出不同的热力学历程.研究了甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸环氧丙酯含量对共聚物乳液性能和涂膜性能的影响.尽可能地使功能基团分布于乳胶粒表层,以充分发挥功能基团在提高共聚物物理机械性能上的优势.乳液的电解质稳定性,离心稳定性以及涂膜的耐水性都随着功能单体甲基丙烯酸环氧丙酯含量的增加而降低,乳液的电导率也随着功能单体甲基丙烯酸环氧丙酯含量的增加而降低;而乳液的表观粘度和乳胶粒的粒径随着功能单体甲基丙烯酸环氧丙酯含量的增加而增加.
学科专业：
授予学位：
学位授予单位：
导师姓名：
学位年度：
本文读者也读过
相关检索词
万方数据知识服务平台--国家科技支撑计划资助项目（编号：2006BAH03B01）(C)北京万方数据股份有限公司
万方数据电子出版社甲基丙烯酸环氧丙酯毒性的研究进展_论文_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
您可以上传图片描述问题
联系电话：
请填写真实有效的信息，以便工作人员联系您，我们为您严格保密。
甲基丙烯酸环氧丙酯毒性的研究进展
||文档简介
中国最大最早的专业内容网站|
总评分0.0|
&&甲​基​丙​烯​酸​环​氧​丙​酯​(​g​l​y​c​i​d​y​l​ ​m​e​t​h​a​c​r​y​l​a​t​e​,​G​M​A​)​作​为​一​种​缩​水​甘​油​醛​的​衍​生​物​主​要​用​于​化​工​材​料​的​合​成​。​大​鼠​急​性​经​口​毒​性​L​D0​为9m​g​/​k​g​,​按​分​级​标​准​属​低​毒​;​大​鼠​蓄​积​毒​性48​.m​g​/​k​g​,​蓄​积​系​数​为.6​,​属​于​弱​蓄​积​性​;​皮​肤​涂​抹​具​有​明​显​的​刺​激​性​和​致​敏​性​;​大​鼠​重​复​口​服​染​毒​可​出​现​血​液​、​生​化​指​标​异​常​及​多​种​组​织​器​官​的​损​伤​;​在​体​内​外​多​项​致​突​变​试​验​的​结​果​呈​阳​性​;​存​在​生​殖​毒​性​和​致​畸​毒​性​;​并
试读已结束，如果需要继续阅读或下载，敬请购买
你可能喜欢　　甲基丙烯酸环氧丙酯
　　Glycidyl methacrylate
　　分子式(Formula)： C7H10O3
　　分子量(Molecular Weight)： 142.15
　　CAS No.： 106-91-2
　　质量指标(Specification)
　　含量（Purity）： 99.50%
　　产地（Orgin）： 日本
　　物化性质(Physical Properties)
　　Density 1.042
point 189°C Refractive index 1.449-1.451 Flash point 76°C Water solubility 0.5-1.0 g/100 Ml at 20°C
　　用途(Useage)
　　主要用于丙烯酸粉末涂料、乳胶涂料、纺织皮革整理剂、胶粘剂、医药等
为本词条添加和相关影像
互动百科的词条（含所附图片）系由网友上传，如果涉嫌侵权，请与客服联系，我们将按照法律之相关规定及时进行处理。未经许可，禁止商业网站等复制、抓取本站内容；合理使用者，请注明来源于。
登录后使用互动百科的服务，将会得到个性化的提示和帮助，还有机会和专业认证智愿者沟通。
您也可以使用以下网站账号登录：
此词条还可添加&
编辑次数：3次
参与编辑人数：3位
最近更新时间： 07:22:45
贡献光荣榜