胚胎体外培养与动物细胞培养条件液有什么不同

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海淀分局备案编号& (2016春o厦门校级期中)下列关于细胞的叙述,错误的是( 
本题难度:0.60&&题型:选择题
(2016春o厦门校级期中)下列关于细胞的叙述,错误的是(  )
A、动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植B、动物细胞培养必须将组织分散成单细胞C、胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化D、造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力,可用于治疗白血病
来源:2016春o厦门校级期中 | 【考点】动物细胞与组织培养过程;胚胎干细胞的来源及分化.
下列关于细胞的叙述正确的是(  )
A、细胞壁是细胞的控制中心B、组织的形成是细胞分化的结果C、所有生物细胞都有线粒体与叶绿体D、西瓜带甜味的物质来自细胞核
要探索生物的奥秘,必须要了解细胞,下列关于细胞的叙述中,正确的是(  )
A、肌肉细胞和果肉细胞结构相同B、细胞壁用于控制物质的进出C、番茄果肉细胞的细胞膜控制物质的进出D、所有细胞都有细胞壁
下列关于细胞的叙述中错误的是(  )
A、细胞是生物体结构和功能的基本单位B、植物细胞的形态多种多样而基本结构都一样C、不是所有生物都具有细胞结构D、细胞能够从周围环境中吸收营养物质而持续生长
下列关于细胞的叙述中,不正确的是(  )
A、细胞核是细胞的控制中心B、细胞分裂总是细胞核先分裂C、叶绿体为细胞的生活提供能量D、光学显微镜下不易看清的是植物细胞膜
下列关于细胞的叙述错误的是(  )
A、细胞时生物体进行生命活动的基本单位B、细胞分裂能使生物体内细胞数目增多C、细胞较小,用肉眼都看不到D、病毒是一种不具有细胞结构的生物
解析与答案
(揭秘难题真相,上)
习题“(2016春o厦门校级期中)下列关于细胞的叙述,错误的是(  )动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植动物细胞培养必须将组织分散成单细胞胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力,可用于治疗白血病”的学库宝(/)教师分析与解答如下所示:
【分析】1、动物细胞培养的过程取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养.2、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性体积较小细胞核大核仁明显在功能上具有发育的全能性可分化为成年动物任何一种组织细胞.另一方面在体外培养条件下ES细胞可不断增殖而不发生分化可进行冷冻保存也可以进行某些遗传改造.
【解答】解:A、胚胎细胞的全能性高于体细胞因此动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植A正确B、正常动物细胞存在接触抑制因此动物培养前需要用胰蛋白酶处理使组织分散成单细胞B正确C、胚胎干细胞在体外培养能增殖也能被诱导分化C错误D、造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力可用于治疗白血病D正确.故选:C.
【考点】动物细胞与组织培养过程;胚胎干细胞的来源及分化.
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知识点讲解
经过分析,习题“(2016春o厦门校级期中)下列关于细胞的叙述,错误的是( ”主要考察你对
等考点的理解。
因为篇幅有限,只列出部分考点,详细请访问。
动物细胞的培养
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。细胞培养是指细胞在体外条件下的生长,动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。动物细胞的培养过程:取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细胞系。
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31.动物细胞培养的培养液中通常应包含的成分是 A.蔗糖 B.维生素 C.动物血清 D.生长素和细胞分裂素 【】
题目列表(包括答案和解析)
人的干扰素在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的干扰素基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳汁生产人干扰素就成为可能。其大致过程如下: Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液,通过体外受精,形成奶牛受精卵; Ⅱ.将人干扰素基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞; Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎; Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。 请回答下列问题: (1)一般情况下,良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足,请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法:____________________________________________。 (2)步骤Ⅰ中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行______________处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的生理反应包括________________反应和卵黄膜封闭作用。 (3)步骤Ⅱ中,将人的干扰素基因导入奶牛受精卵最为有效的方法是___________________________。导入基因前,需要将干扰素基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤属于基因工程“四步曲”中的_____________________________________________,此步骤的目的是____________________________________________________________________________________________。 (4)实验步骤Ⅲ中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加______________和动物血清。 (5)实验步骤Ⅳ中,应选择性别为_____________的奶牛胚胎进行移植。请举出一种人工控制或筛选胚胎性别的方法:____________________________________________________________。 (6)若需迅速得到大量转基因奶牛,可采用以下两种处理方法: 方法A:在步骤Ⅳ中将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞,让其分别发育成一头小牛。进行上述操作时,应选择发育至最佳时期的胚胎进行操作,分割时必须注意要将早期胚胎中的______________均等分割。 方法B:在步骤Ⅳ中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的______________细胞中,使其重组并发育成新胚胎。为获得大量可供移植的胚胎细胞核,可将早期胚胎细胞分离出来,在添加了抑制因子的培养液中,将其培养成能够增殖而不发生分化的________________细胞,再从该细胞中提取所需的细胞核。 上述两种方法中,最能保持步骤Ⅳ中早期胚胎细胞遗传特征的是方法______________。 &
人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下:Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液,通过体外受精,形成奶牛受精卵;Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞;Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎;Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。请回答下列问题:(1)步骤I中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行&   &处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的的生理反应包括透明带反应和&&&&&&&&&&&&&&&&&&&作用。(2)步骤II中,将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵最为有效的方法是& &&&&。导入基因前,需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤属于基因工程“四步曲”中的&           &&&&。(3)实验步骤III中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加激素和&&&&&&&&&&&&&&&。(4)实验步骤IV中,应选择性别为   &的奶牛胚胎进行移植。(5)若需迅速得到大量转基因奶牛,现有两种处理方法:方法A:在步骤IV中将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞,让其分别发育成一头小牛。进行上述操作时,应选择发育至桑椹胚或囊胚阶段的胚胎进行操作,分割时必须注意要将早期胚胎中的&    &均等分割。方法B:在步骤IV中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的&   &细胞中,使其重组并发育成新胚胎。为获得大量可供移植的胚胎细胞核,可将早期胚胎细胞分离出来,在添加了抑制因子的培养液中,将其培养成能够增殖而不发生分化的胚胎干细胞,再从该细胞提取所需的细胞核。
人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下:Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液,通过体外受精,形成奶牛受精卵;Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞;Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎;Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。请回答下列问题:(1)步骤I中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行&    & 处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的的生理反应包括透明带反应和&&&&&&&&&&&&&&&&&&&作用。(2)步骤II中,将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵最为有效的方法是&  &&&&。导入基因前,需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤属于基因工程“四步曲”中的&            &&&&。(3)实验步骤III中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加激素和&&&&&&&&&&&&&&&。(4)实验步骤IV中,应选择性别为    & 的奶牛胚胎进行移植。(5)若需迅速得到大量转基因奶牛,现有两种处理方法:方法A:在步骤IV中将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞,让其分别发育成一头小牛。进行上述操作时,应选择发育至桑椹胚或囊胚阶段的胚胎进行操作,分割时必须注意要将早期胚胎中的&     & 均等分割。方法B:在步骤IV中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的&    & 细胞中,使其重组并发育成新胚胎。为获得大量可供移植的胚胎细胞核,可将早期胚胎细胞分离出来,在添加了抑制因子的培养液中,将其培养成能够增殖而不发生分化的胚胎干细胞,再从该细胞提取所需的细胞核。&
人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下:Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液,通过体外受精,形成奶牛受精卵;Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵;Ⅲ.电脉冲刺激上述受精卵,促使其形成早期胚胎;Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。请回答下列问题:(1)一般情况下,良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足,请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法:&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。(2)步骤Ⅰ中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行&&&&&&&&&&&&处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是:&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&和&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。(3)步骤Ⅱ中将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵之前要进行基因表达载体的构建,其目的是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。一个基因表达载体的组成包括&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&、&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&、&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&、&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。(4)实验步骤Ⅲ中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加&&&&&&&&& 和动物血清。(5)实验步骤Ⅳ中,应选择性别为&&&& &&&&&的奶牛胚胎进行移植。(6)若需迅速得到大量转基因奶牛,现有两种处理方法:方法A:在步骤Ⅳ中将早期胚胎切割成二等份,让其分别发育成一头小牛。进行上述操作时,应选择发育至&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&阶段的胚胎进行操作,分割时必须注意要将早期胚胎中的&&&&&&&&&&&&&&&均等分割。方法B:在步骤Ⅳ中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&细胞中,使其重组并发育成新胚胎,进行胚胎移植后使之继续发育成小牛。上述两种方法中,最能保持步骤Ⅳ 中早期胚胎细胞遗传特征的是方法________。&
人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下:   Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液,通过体外受精,形成奶牛受精卵;   Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞;   Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞,促使其形成早期胚胎;   Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。   请回答下列问题:   (1)一般情况下,良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足,请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法:________________________________________________________________________。   (2)步骤Ⅰ中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行________处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的生理反应包括________反应和卵黄膜封闭作用。   (3)步骤Ⅱ中,将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵最为有效的方法是________。导入基因前,需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤属于基因工程“四步曲”中的__________________,此步骤的目的是____________________________________________,其中将血清白蛋白基因与调控组件结合时必须用到限制性核酸内切酶和________酶。   (4)实验步骤Ⅲ中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加________和动物血清。   (5)实验步骤Ⅳ中,应选择性别为________的奶牛胚胎进行移植。请举出一种人工控制或筛选胚胎性别的方法:____________________。    (6)若需迅速得到大量转基因奶牛,现有两种处理方法:   方法A:在步骤Ⅳ中将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞,让其分别发育成一头小牛。进行上述操作时,应选择发育至________阶段的胚胎进行操作,分割时必须注意要将早期胚胎中的________均等分割。   方法B:在步骤Ⅳ中将早期胚胎细胞的细胞核移植到普通黄牛的________细胞中,使其重组并发育成新胚胎。为获得大量可供移植的胚胎细胞核,可将早期胚胎细胞分离出来,在添加了抑制因子的培养液中,将其培养成能够增殖而不发生分化的________细胞,再从该细胞中提取所需的细胞核。   上述两种方法中,最能保持步骤Ⅳ中早期胚胎细胞遗传特征的是方法________。 &
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动物细胞培养1907年,哈里森(Harrison)在无菌条件下用作培养基,培养蛙胚神经组织存活数周,并观察到神经细胞突起的生长过程,由此创建了盖片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法,奠定了动物组织体外培养的基础。之后,又有人将悬滴培养法改良为双盖片培养,提高了传代效率并减少了污染;1923年,(Carrel)设计了,扩大了组织生存空间。&1951年,&厄尔&(Earle)&发明了体外培养动物细胞的人工合成培养基。1951年,波米拉(Pomerat)设计了灌流小室,使细胞生活在不断更新的培养液中,便于作显微摄影和细胞代谢的研究。1957年,格拉夫(Graff)用灌流技术进一步提高了细胞悬浮培养的效率。1957年,杜尔贝科(Dulbecco)等人采用胰蛋白酶消化处理和应用液体培养基的方法,获得了单层细胞培养。单层培养法的出现,对组织培养的发展起了很大的推动作用。此后单层培养成为组织培养普遍应用的技术。20世纪60年代后,动物细胞大规模培养技术开始起步,并逐步发展。20世纪80年代后,随着基因工程和其他细胞工程技术的发展,细胞培养技术已成为转基因技术、生物制药及其他许多技术的基础,在现代生物技术中发挥着重要的作用。
简介/动物细胞培养
动物细胞培养液的成分
体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同,例如,需要糖、、、促生长因子、等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分。
动物细胞培养液的特点
液体培养基、通常含动物血清。
动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)
血清和血浆&(提供细胞生长必须的营养成份)
温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4)
气体环境(95%的空气+5%CO?的混合气体)
其中5%CO?气体是为保持培养液的pH稳定
过程/动物细胞培养
取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细胞系。培养基添加胰岛素可促进细胞对的摄取。
分类/动物细胞培养
1&根据细胞种类:原代细胞培养,&传代细胞培养
原代细胞:将动物各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)&或方法处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。培养的细胞为正常的动物细胞,一般培养10代后不再增殖,死亡。
传代细胞:传代培养是细胞培养常规保种方法之一,也是所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长,这一过程就叫传代。传代培养可获得大量供实验所需细胞。细胞传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细地无菌操作。培养的细胞为癌变或人为癌化的细胞,理论上可以无限。癌化的方式有很多:进行癌基因突变,感染病毒,从癌症供体体内分离,物理或化学方法(如紫外,化学试剂)等。
2&根据培养方式:贴壁细胞培养,半悬浮细胞培养,悬浮细胞培养
区别/动物细胞培养
培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养基)。
培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组织培养则不需要,而需要加入植物生长激素。
产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是只含同一种的细胞的一个细胞系(或者叫细胞群)。
原理不同:植物组织的原理为植物细胞的全能性,动物细胞培养的原理为细胞的增殖。
过程不同:植物组织培养的过程为脱分化和再分化,动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养
技术应用/动物细胞培养
生物制品的生产(如制备单克隆抗体)
转基因动物的培养
检测有毒物质并判断其强弱
医学研究(生理&病理&药理)
器官移植培养
筛选抗癌药物
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