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来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2015-06-11 03:25 标签： 求大神帮忙ps一下
三门峡职业技术学院怎么样呀_百度知道
三门峡职业技术学院怎么样呀
一个宿舍都还是单身，食堂的碗也变得更小了，来上专科的，美女嘛，饭价又涨了！学校嘛整天都在搞卫生，整天都在扫地，教学水平嘛，你不学谁也没办法，我们系就一个女，即使给你教授级别的老师呵呵
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选择权在你全日制普通高职院校，你可以去看看。环境还好！网上写的都不一定是真的，好好学能学的到东西
建议你亲自到学校转转， 会有收获的
网上得来终觉浅，要知此事需躬行
我们系的女生就好多，男生倒没有几个，老师又温柔又幽默风趣，🌹🌹🌹
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must be stopped fromcan't be soldBy whom should be taughtDo you think young should be allowed to watch scary movies?
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should teach&& 查看话题
求助：质粒酶切问题，质粒被切飞了啊！！
为什么我的AgeI酶切pLKO,1质粒载体每次切出来都是这个样子啊，求大侠们指点指点，严重影响实验进展了啊
&&A=AgeI&&E=EcoRI&&AE=AgeI/EcoRI&&78=pLKO.1质粒。菜鸟新手上路，求高手们赐教啊！
还有第三张是我用试剂盒提的质粒，0.8%跑胶成这个样子。不知提的纯不纯啊？、？
要shi的赶脚都有了！切了一个月了！
试剂盒提取的质粒
载体酶切 上午.jpg
第三次提取质粒酶切&&1&& 13hr 41min.jpg
不纯是肯定的了，换换试剂盒吧，要不自己配制 切的时间太长了，切碎了 : Originally posted by HYZ221314 at
不纯是肯定的了，换换试剂盒吧，要不自己配制 谢谢你的回复，我用的天根的质粒小提中量试剂盒，唉！怎么那么多条带？ : Originally posted by 快乐农夫 at
切的时间太长了，切碎了 我切啦各种时间点的，都是这样！10～20～30～40～60～120Min。 : Originally posted by Lotus617 at
谢谢你的回复，我用的天根的质粒小提中量试剂盒，唉！怎么那么多条带？
... 二楼也对，切时间太长了？做不出来什么都有可能 提的不好，条带太多了。 LZ用的内切酶是快切酶还是普通酶啊，快切酶10分钟就切好了，如果切5分钟就能把质粒切碎那酶就不能用，换其他公司的吧，有些内切酶要添加BSA，你看看说明书上有没有说明，从图上看第二张图的78E好像切的还可以。 很显然，既然你切10分钟都是这个样子，那么你的质粒本身存在严重的降解，就是说没有用酶切，自己就碎了，如果是老质粒，说明降解严重，如果是新提的，说明压根就没提出来 : Originally posted by HYZ221314 at
不纯是肯定的了，换换试剂盒吧，要不自己配制 今天我又把之前提的质粒拿来跑了一次，1%gel.有人说还可以，我也不确定到底可用不可用!请你们帮我看看！
未酶切质粒A 1&& 11hr 56min_2345看图王.jpg
未酶切质粒B 1&& 11hr 56min_2345看图王.jpg
78凝胶回收A 3
15hr 58min.jpg : Originally posted by luwei13566 at
LZ用的内切酶是快切酶还是普通酶啊，快切酶10分钟就切好了，如果切5分钟就能把质粒切碎那酶就不能用，换其他公司的吧，有些内切酶要添加BSA，你看看说明书上有没有说明，从图上看第二张图的78E好像切的还可以。 用的neb的酶，自带有buffer1.1，不用加BSA。
另外我买了buffer1需加BSA，酶切结果一样。都碎了 : Originally posted by 红卫大兵 at
提的不好，条带太多了。 :hand::( : Originally posted by Lotus617 at
今天我又把之前提的质粒拿来跑了一次，1%gel.有人说还可以，我也不确定到底可用不可用!请你们帮我看看！
未酶切质粒A 1&& 11hr 56min_2345看图王.jpg
未酶切质粒B 1&& 11hr 56min_2345看图王 ... 这次的质粒没有问题，可以切一次看看 : Originally posted by Lotus617 at
用的neb的酶，自带有buffer1.1，不用加BSA。
另外我买了buffer1需加BSA，酶切结果一样。都碎了... NEB的酶我用过，完全没有问题，除非分销商做了手脚:secret:
LZ可以37度用buffer1.1切割2个小时看看，如果还是碎就25度buffer1.1切割12个小时，我以前用过的NEB的pmeI&&25度切16个小时，效果很好，不用担心star活性。 : Originally posted by Lotus617 at
谢谢你的回复，我用的天根的质粒小提中量试剂盒，唉！怎么那么多条带？
... 实验室里堆了一堆此试剂盒，宁愿等着它过期也不去用，呃，亲，你懂的~ 天跟提质粒的，还可以，我用过，效率和纯度都可以满足酶切克隆什么都，没有问题。
看你图片，质粒提取也没什么问题。可能你的酶有问题吧，或者是你单酶切用78A体系有问题，温度什么的，都好好看看，双酶切看起来不也酶什么问题么？ 质粒提得挺好的 也没看到有降解 且EcoRI单酶切切得也还好 问题就只在AgeI这个酶上
估计酶被污染了 导致导致质粒降解
买一管新的酶试试看喽 谢谢各位的建议，各种可能的原因我都考虑进来做过，都还是切碎了，综合看来就是酶的问题啦！唉😔，可恶的经销商～～～！！！非常感谢大家！🌹🌹🌹🌹💝💝💝💝💝🍺🍺🍺🍺🍺🍺☕☕☕☕☕👑👑👑👑👑👑💰🏆🏆🏆🏆🏆🏆 我也遇到过这情况，我是用分子克隆书上SDS大提的质粒，跑出条带好的话，酶切多久都没问题的，不然你试下？祝你好运！ : Originally posted by HYZ221314 at
不纯是肯定的了，换换试剂盒吧，要不自己配制 :):)求翻译🌹🌹🌹 _百度作业帮
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求翻译🌹🌹🌹
求翻译🌹🌹🌹&
人们总认为双胞胎是一样的。这是真的吗？求解题过程。。。感谢🌹🌹🌹 _百度作业帮
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求解题过程。。。感谢🌹🌹🌹
求解题过程。。。感谢🌹🌹🌹&
看不清咋解

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